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人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;TE671 Subline No.2
貨號(hào) | AXB10050 | 規(guī)格 | 1×106 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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人肺癌細(xì)胞;A549/OVA
英文名稱 | A549/OVA | 貨號(hào) | AXB10050 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
分類 | 人細(xì)胞系 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別:
一、概念不同
1、細(xì)胞株:細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株(Cell Strain)。
2、細(xì)胞系:細(xì)胞系(cell line)指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。 也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。
二、形成方法不同
1、細(xì)胞株:通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物成為細(xì)胞株。
2、細(xì)胞系:經(jīng)過(guò)40-50次分裂的渡過(guò)第二次死亡危機(jī),原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功成為細(xì)胞系。
三、細(xì)胞的延續(xù)性不同
1、細(xì)胞株:原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細(xì)胞的生長(zhǎng)就會(huì)出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去,這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40--50代,這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。
2、細(xì)胞系:細(xì)胞株的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)",不能再傳下去。但是有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),有可能在培養(yǎng)條件下無(wú)限制地傳代下去,這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。
細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥的消毒及布局
保持細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥內(nèi)的整潔有序,將所有物品置于直視范圍內(nèi)。
向放入通風(fēng)櫥內(nèi)的所有物品噴灑70%乙醇,擦拭清潔進(jìn)行消毒。
在通風(fēng)櫥中部開闊處放置細(xì)胞培養(yǎng)容器;移液器置于右前方易于取用;試劑和培養(yǎng)基置于右后方便于吸?。辉嚬芗苤糜谥泻蟛?;小型容器置于左后部用于盛放廢液。
培養(yǎng)瓶/皿等物品的無(wú)菌操作
細(xì)胞培養(yǎng)污染物主要分為兩類:
化學(xué)污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)、內(nèi)毒素、增塑劑和去污劑。
生物污染物,如細(xì)菌、霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細(xì)胞系的交叉污染。
可通過(guò)充分了解污染源以及采用良好的無(wú)菌技術(shù),降低污染發(fā)生的頻率和嚴(yán)重程度。
交叉污染的確認(rèn)
為細(xì)胞換液時(shí),要沿著培養(yǎng)瓶的一側(cè)輕輕地加入,而不是直接加到細(xì)胞中,以免損傷細(xì)胞,當(dāng)培養(yǎng)的細(xì)胞株較為脆弱時(shí)尤其需要注意。
使用無(wú)菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液體時(shí),每支吸管只能使用一次,以免交叉污染。
細(xì)胞傳代的時(shí)間把握
當(dāng)細(xì)胞呈指數(shù)增殖,貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞已占據(jù)所有可用基質(zhì)、沒有擴(kuò)增空間,或懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞已超過(guò)培養(yǎng)基質(zhì)所支撐的能力,無(wú)法進(jìn)一步生長(zhǎng)時(shí),細(xì)胞增殖速度將大大降低甚至停止。為了將細(xì)胞密度維持在最佳水平,以便細(xì)胞繼續(xù)生長(zhǎng),并且刺激進(jìn)一步增殖,必須對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代。
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細(xì)胞培養(yǎng)的步驟:
細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備
細(xì)胞變質(zhì)的征象包括核周出現(xiàn)顆粒、細(xì)胞與基質(zhì)解離以及細(xì)胞質(zhì)空泡形成。
這些變質(zhì)征象可能為多種原因所致,例如:培養(yǎng)物污染、細(xì)胞系衰老或培養(yǎng)基中存在毒性物質(zhì),或者這些征象僅表明培養(yǎng)物需要更換培養(yǎng)基。
變質(zhì)嚴(yán)重時(shí)將會(huì)成為不可逆的變化。
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