當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T赤羽病病毒(AKAV)核酸檢測試劑盒
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
赤羽病病毒(AKAV)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10374 |
PCR技術(shù)的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
米根霉培養(yǎng)基: CM0085小曲酒。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 定期移植法;其他
-436℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
枝孢生長條件: 25℃培養(yǎng)基: 14提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
短小芽孢桿菌能于30℃,堿性菌(pH12), 堿性羧甲基纖維素平板上分泌堿性纖維素酶,形成透明圈模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃
AS2.181釀造醬油模式菌株: no種屬: Zygosaccharomyces│rouxii提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃
大腸埃希菌研究模式菌株: no病料提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
小刺青霉培養(yǎng)基: 14模式菌株: no白樺根系土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法
球毛殼菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no花生提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 26 定期移植法
-437℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
優(yōu)雅食烷菌有機污染物降解菌/石油烴類降解菌模式菌株: no水樣/深層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 25℃
魏登施泰芽孢桿菌纖維素降解菌模式菌株: no長期落葉腐殖質(zhì)層提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃
HBUM74687模式菌株: no安全等級: 1種屬: Streptomyces│sp.土壤提供形式: 凍干物培養(yǎng)基: 0305生長條件: 28℃
短鏈孢霉屬培養(yǎng)基: CM0014抗癌活性提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28C -80℃冰箱凍結(jié)
根霉生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Methanobrevibacter smithii模式菌株: 未知
-438℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
MercuryAR500g
SM1213GeneRuler Ultra Low Range DNA Ladder, ready-to-use165
A3256-10GD-(-)-Arabinose D-阿拉伯糖10323-20-310g
甲基綠染色液100ml
Minocycline250mg
異丙醇IsopropanolGCS2ml
SM1771NoLimits 17000bp DNA Fragment218
F0500--5GFast Blue RR Salt 固藍RR鹽14726-29-55g
1g
α-Ketoglutaric Acid100g
大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)免疫試劑盒 Human alpha-fetoprotein Lens culinaris aggliin 3,AFP-L3 ELISA Kit
谷胱甘肽還原酶(GR)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratmaixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanHeparanase,HPAELISA試劑盒人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLipoxinA4,LXA4ELISAKit人脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
赤羽病病毒(AKAV)核酸檢測試劑盒改良MSRV培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于沙門氏的分離培養(yǎng)
MS培養(yǎng)基(不含有機元素,不含瓊脂和蔗糖)規(guī)格:250g用途:用于植物組織培養(yǎng)(不含有機元素,不含瓊脂和蔗糖)
維生素C(抗壞血)規(guī)格:10g詳情介紹
瓊脂LT100規(guī)格:250g用途:用于食品中細菌計數(shù)
水稻赤霉菌培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于水稻中赤霉菌培養(yǎng)
牛血清白蛋白規(guī)格:10g詳情介紹
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