當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>大鼠ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TOH大鼠25羥基維生素D3ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | OH大鼠25羥基維生素D3ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Rat 25-Dihydroxy vitamin D3, HVD3 Elisa Kit |
貨號 | FS-R64584 |
公司“質量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
磷酸化神經細胞鳥苷酸置換因子Ephexin1抗體英文全稱fatty acid desaturases2英文簡稱FADS2檢測范圍3348nmol/L-64U/L
磷酸化Ephrin B抗體英文全稱Shikimate o-hydroxyl-cirmamoyltransferase英文簡稱HQT檢測范圍3349nmol/L-640U/L
惡性腫瘤丟失蛋白EPLIN抗體英文全稱Reduced glutataione enzym英文簡稱GSH檢測范圍3350nmol/L-200U/mL
磷酸化HER2受體抗體英文全稱decarboxylase英文簡稱DC檢測范圍3351nmol/L-10ng/ml
磷酸化HER3受體抗體英文全稱starch debranching enzyme英文簡稱SDBE檢測范圍3352nmol/L-400IU/L
磷酸化HER4抗體英文全稱Cathepsin B英文簡稱CB檢測范圍3353nmol/L-200U/L
轉錄因子ERF抗體英文全稱1,4-α-D-glucanotrnsferase英文簡稱1,4-α-D-G檢測范圍3354nmol/L-80U/L
磷酸化轉錄因子ERF抗體英文全稱pyrophosphorylase英文簡稱ADPG檢測范圍3355nmol/L-200U/L
真核肽鏈釋放因子1抗體英文全稱sucrose英文簡稱sucrose檢測范圍3356nmol/L-400ug/ml
真核肽鏈釋放因子3a抗體英文全稱fructose英文簡稱fructose檢測范圍3357nmol/L-640ug/ml
表皮生長因子受體底物15抗體英文全稱Flavanone-3-hydroxylase英文簡稱F3H檢測范圍3358nmol/L-10ng/ml
內吞作用輔助蛋白EPN1抗體英文全稱trehalose-6-phosphate synthase英文簡稱TPS檢測范圍3359nmol/L-80U/L
內吞作用輔助蛋白EPN2抗體英文全稱β-cyanoalanine synthase英文簡稱β-檢測范圍3360nmol/L-100U/L
內質網定位蛋白ERGI3抗體英文全稱1-Aminocyclopropanecarboxylic Acid英文簡稱ACC檢測范圍3361nmol/L-80ng/ml
內質網氧化物蛋白Ero1-Lα抗體英文全稱β-Thioglucoside glucohydrolase;myrosinase英文簡稱β-tg檢測范圍3362nmol/L-800U/L
內質網蛋白ERp19抗體英文全稱mitogen activited protein kinase 20英文簡稱MAPK20檢測范圍3363nmol/L-80U/L
小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒β-Amyloid (1-42 Specific) (D9A3A) Rabbit mAb20 ul
小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒β-Amyloid (1-42 Specific) (D9A3A) Rabbit mAb100 ul
小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒β-Amyloid (pE3 Peptide) (D5N5H) Rabbit mAb20 ul
小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒β-Amyloid (pE3 Peptide) (D5N5H) Rabbit mAb100 ul
小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒CDCA2 (D7T4P) Rabbit mAb100 ul
小鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒CENP-E Antibody100 ul
小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒Phospho-Rad18 (Ser403) (D2T6W) Rabbit mAb100 ul
小鼠誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒IRGM Antibody (Rodent Specific)100 ul
OH大鼠25羥基維生素D3ELISA試劑盒實驗原理GLIS2蛋白抗體Benzo[b]thiophene-2-carboxylic acid別名: 分子式: C9H6O2S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
鳥苷環(huán)化酶激活蛋白1抗體D(-)-Arginine別名: 分子式: C6H14N4O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
GSK3B相互作用蛋白抗體1-Benzothiophene-3-carbaldehyde別名: 分子式: C9H6OS性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
高爾基體膜相關蛋白6抗體Benzofuran-2-carboxylic acid別名: 分子式: C9H6O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
高爾基體自身蛋白GM130抗體Benserazide hydrochloride別名: 分子式: C10H16ClN3O5性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
糖代謝相關蛋白1抗體Bathophenanthroline別名: 分子式: C24H16N2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
G蛋白偶聯受體64抗體3H-1,2-Benzodithiol-3-one-1,1-dioxide別名: 分子式: C7H4O3S2性狀: Powder純度: 90.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
γ氨基丁受體相關蛋白樣1抗體Benactyzine hydrochloride別名: 鹽乃嗪分子式: C20H26ClNO3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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