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貨號 | FS-X10561 |
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英文名稱:Savolitinib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10561
產(chǎn)品介紹:
Savolitinib是c-Met激酶抑制劑,IC50值為5nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:1313725-88-0 別名:Volitinib;HMPL-504;AZD-6094 純度:99.78% 分子量:345.36 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
腸桿菌屬鋅指蛋白471抗體Anti-MXD1 Antibody平滑肌肌動蛋白γ2(ACTγ2)
竹喙球菌γ-基丁A受體相關(guān)膜蛋白3Anti-MYBL1 Antibody平滑肌肌動蛋白α2(ACTα2)
弧菌鋅指蛋白909抗體Anti-MYBL2 Antibody平滑肌蛋白3(LMOD3)
抗生鏈霉菌鋅指蛋白420抗體Anti-MYC Antibody平滑肌蛋白2(LMOD2)
生黃色鏈霉菌周期蛋白1結(jié)合蛋白抗體Anti-MYBPC3 Antibody平滑肌蛋白1(LMOD1)
曲霉鋅指蛋白318抗體Anti-MYD88 Antibody能受體P2Y12(P2RY12)
鮑姆桑黃鋅指蛋白281抗體Anti-MYC Antibody能受體P2X7(P2RX7)
平臍蠕孢菌鋅指蛋白274抗體Anti-MYD88 Antibody霉敏感性肽(PSA)
亮白曲霉鋅指蛋白81抗體Anti-MYF5 Antibody皮質(zhì)3(CTXN3)
羅爾夫青霉鋅指蛋白148抗體Anti-MYD88 Antibody(PB0158)皮質(zhì)2(CTXN2)
扣囊復膜孢酵母鋅指蛋白342抗體Anti-MYD88 Antibody皮質(zhì)1(CTXN1)
擬棒形節(jié)叢孢鋅指蛋白350/癌易感基因1結(jié)合蛋白抗體Anti-MYLK Antibody皮質(zhì)穩(wěn)定蛋白(CORT)
柱隔孢菌鋅指蛋白263抗體Anti-N Cadherin/CDH2 Antibody皮質(zhì)結(jié)合球蛋白(CBG)
克魯斯假絲酵母鋅指蛋白195抗體Anti-NAB2 Antibody皮屑蛋白樣蛋白1(LEPREL1)
大腸埃希氏桿菌鋅指蛋白266抗體Anti-N WASP/WASL Antibody皮卡丘(Pikachurin)
樟疫霉鋅指蛋白786抗體Anti-NAA15 Antibody皮膚衍生肽抑制因子3(PI3)
嗅球蛋白1抗體頭葡萄球菌解脲亞種原代細胞提取物
含氧轉(zhuǎn)移1抗體木賊鐮孢人小腸粘膜上皮細胞提取物
胚胎干細胞關(guān)鍵蛋白190抗體N端Amycolatopsisdecaplanina人食管上皮細胞提取物
有機溶質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白OSTβ抗體Amycolatopsiskeratiniphilasubsp.keratiniphila人結(jié)腸平滑肌細胞提取物
c-Met激酶抑制劑(Savolitinib)褐色諾卡氏 十二烷基三苯基溴化膦蛋白質(zhì)羧基
北方蜜環(huán) 2,4-二氟苯甲輪狀病
枝孢屬 三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮)釹(III)巨噬炎性蛋白-1α
大腸桿 化銠病H7N9亞型抗體
產(chǎn)紅青霉 4-三氟基異酯病H5N1亞型抗體
草青霉 3-氧代環(huán)丁基叔丁酯4-羥基壬烯
蠟狀芽孢桿 化鏑(III),超干 (REO)促胰液
丁香葉點霉 2-羥基-3-氟吡啶低氧誘導因子-1α
微紫青霉 4-二氟甲氧基(易)血管緊張Ⅱ
中國臺灣根霉 鹽苯尼克酰腺二核磷氧化4
嗜麥芽黃單胞 3,3'-二硫代二二甲酯內(nèi)
曲霉 核因子κB抑制蛋白α
球孢白僵 環(huán)磺酰α轉(zhuǎn)運蛋白
蘇云金芽孢桿 3--2,4-二氟核因子-κB亞基p65親和肽
枯草芽孢桿 1-N-Boc-2-基新孢子蟲抗體
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