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貨號 | FS-X10727 |
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產(chǎn)品介紹:
KJ Pyr9是一種新型MYC抑制劑。體外實驗中,KJ Pyr9抑制MYC的Kd值為6.5±1.0nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:581073-80-5 純度:98.98% 分子量:385.37 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
中文名稱:新型MYC抑制劑(KJ Pyr 9)
英文名稱:KJ Pyr 9
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10727
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
平菇2磷化增殖核多肽抗原Anti-DMGDH Antibody人活化A(ACV-A)
玫瑰單胞菌足特異蛋白抗原Anti-DMAP1 Antibody 人活化A(ACV-A)
鞘盒菌屬血小板源性生長因子-BB抗原Anti-DMGDH Antibody人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)
泡盛曲霉胰十二指腸同源異型盒基因抗原Anti-DMPK Antibody人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)
燼灰藍鏈霉菌果膠抗原Anti-DNAI2 Antibody人心鈉肽(ANP)
孢小克銀漢霉南變種肝癌高表達基因抗原Anti-DNAI1 Antibody人心鈉肽(ANP)
禾谷絲核菌腦啡肽Anti-DMTN Antibody人多巴D2受體(D2R)
光滑假絲酵母腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白2/小肽轉(zhuǎn)運蛋白2抗原Anti-DMTN Antibody人多巴D2受體(D2R)
正青霉蛋白激R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗原Anti-DNAJB1 Antibody人內(nèi)肽-2(EM-2)
嗜冷成對桿菌纖維束蛋白同源物1/肌動蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗原Anti-DNAJB11 Antibody人內(nèi)肽-2(EM-2)
枯草芽孢桿菌胃蛋白原C蛋白抗原Anti-DNAJB11 Antibody人α-內(nèi)肽(α-EP)
瑞士乳桿菌過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗原Anti-DNAJC17 Antibody人α-內(nèi)肽(α-EP)
相思根瘤菌顆粒蛋白前體抗原Anti-DNAJB4 Antibody人抑制(INH)
豇豆慢生根瘤菌抑制/腫瘤抑制因子抗原Anti-DNAJC17 Antibody人抑制(INH)
土生類諾卡氏菌蛋白激A(多肽)Anti-DNM1 Antibody人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)
香菇尿激型纖溶原激活因子(多肽)Anti-DNAL4 Antibody人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)
蛋白激Cdelta結(jié)合蛋白抗體糖化酵母人子宮內(nèi)膜癌細胞
轉(zhuǎn)錄因子RPF1抗體卡爾斯伯酵母人彌漫性大細胞淋巴瘤B淋巴細胞
蛋白磷2A抑制劑1抗體滅酵母小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞
橋粒相關蛋白DRS抗體粉狀畢赤酵母Walker氏癌肉瘤256瘤株
新型MYC抑制劑(KJ Pyr 9)硫氧化檸檬胞 四己基溴化CD34分子
紅色鹽幾何形 2-對氨基苯基-2'-羥基二乙硫鹽snap-tag蛋白
布氏乳桿 1-(基硅基)-1H-苯并三唑血清淀粉樣蛋白A
枇杷假尾孢 三(4-溴苯基)白介12
平菇 1-甲基-1,4-環(huán)己二烯腫瘤壞死因子γ
枯草芽孢桿 3-溴-1,1,1-三氟酮P選擇
模擬乳粉霉酵母質(zhì)控樣品(定量) 原丁酯二磷腺
黃色粘球* 3-新戊酰膽囊收縮
枯草芽孢桿 對甲苯基溴化鎂細小病IgA抗體
豬丹絲 四乙基四氟細小病IgM抗體
短波單胞 5-甲基異噁唑-4-甲血紅蛋白
鞘氨單胞屬 2-氨基-5-溴-6-萊姆病抗原
漏斗多孔 N-(4-氨酰)-L-谷基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2
熱噬淀粉芽孢桿 2-溴乙基磺鈉(SBES)同型半胱
好熱地芽孢桿 三氟磺乙酯神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1
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