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貨號 | AXB6306 | 規(guī)格 | 1×106 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | HLC-1人非小細胞肺癌細胞 | 貨號 | AXB6306 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | HLC-1 |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態(tài)好,細胞數(shù)量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng):取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
公司正在出售的產(chǎn)品:
PROG(Human Progesterone) ELISA kit 人孕激素/孕酮Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-EDG6/SLP4 內(nèi)皮細胞的分化蛋白6抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh KLHDC8A KLHDC8A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
TR(Human Testoterone recepter) ELISA Kit 人睪酮受體 96T
PARP3 英文名稱: 多腺苷二0酸多聚酶3抗體/多聚ADP-核糖聚合酶3 0.2ml
CD39L4 英文名稱: 原癌基因CD39樣蛋白4抗體 0.2ml
Ai-EDG6/SLP4 內(nèi)皮細胞的分化蛋白6抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
iFABP(Human iestinal fatty acid binding protein) ELISA Kit 人腸脂肪酸結(jié)合蛋白Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-MMP-17 基質(zhì)金屬蛋白酶-17抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh Iegrin β1/CD29 整合素β1抗體 規(guī)格 0.1ml
IGFBP-3 ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3 96T
PARP16 英文名稱: 多腺苷二0酸多聚酶16抗體 0.2ml
C8orf33 英文名稱: 8號染色體開放閱讀框33抗體 0.2ml
Ai-MMP-17 基質(zhì)金屬蛋白酶-17抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Human chemerin ELISA Kit 人chemerinMulti-class aibodies規(guī)格: 96T
Ai-PRL2/PTP4A2 肝再生0酸酯酶2抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh HDAC3/HD3 組蛋白去乙?;?抗體 規(guī)格 0.1ml
ProGRP(Human pro-gastrin-releasing peptide) ELISA Kit 人胃泌素釋放肽前體 96T
PARP1 英文名稱: 多腺苷二0酸多聚酶抗體/多聚ADP-核糖聚合酶1 0.1ml
BSX 英文名稱: 腦特異性同源蛋白BSX抗體 0.2ml
Ai-PRL2/PTP4A2 肝再生0酸酯酶2抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
ACE(Human Angiotensin converting enzyme) ELISA Kit 人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-oxytocin receptor 催產(chǎn)素受體(受體)抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus aibody Rh IBRDC2/RNFB E3泛素蛋白連接酶B抗體(環(huán)指蛋白B) 規(guī)格 0.2ml
HLC-1人非小細胞肺癌細胞ICAM-3/CD50 ELISA Kit 大鼠細胞間粘附分子3 96T
PARP 英文名稱: 多腺苷二0酸多聚酶抗體(N端) 0.1ml
CLK3 英文名稱: 細胞分裂周期樣激酶3抗體 0.2ml
Ai-oxytocin receptor 催產(chǎn)素受體受體)抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Casp-3(Human Caspase 3) ELISA Kit 人胱天蛋白酶3Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-NRF-1 核呼吸因子-1抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh IGC 非洲爪蟾IGC抗體 規(guī)格 1ml
VK1 ELISA Kit 大鼠K1 96T
PARL 英文名稱: 骨骼肌細胞線粒體膜蛋白PARL抗體 0.2ml
Calcyphosine 2 英文名稱: 鈣0蛋白2抗體 0.2ml
Ai-NRF-1 核呼吸因子-1抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
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