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貨號 | AXB6234 | 規(guī)格 | 1×106 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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產(chǎn)品名稱 | F-36P人白血病細胞 | 貨號 | AXB6234 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | F-36P |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態(tài)好,細胞數(shù)量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Human islet amyloid polypeptide,IAPP ELISA Kit 人胰島淀粉樣多肽Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-SCYLV 甘蔗SCYLV抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh GPV/Goose parvovirus 鵝細小病毒GPV抗體 規(guī)格 0.2ml
human gastric carcinoma Marker ELISA Kit 人胃癌標志物 96T
OGG1 英文名稱: 8-羥基鳥DNA糖基化酶 0.1ml
BOD1 英文名稱: 雙向染色體細胞分裂蛋白1抗體 0.2ml
Ai-SCYLV 甘蔗SCYLV抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
human Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX ELISA KIT 人甲肟前列腺素D2Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-SHBG 性激素結(jié)合球蛋白抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh GPIP137 糖0脂酰肌醇錨定蛋白137抗體 規(guī)格 0.2ml
PAP ELISA Kit 大鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物 96T
OGFOD2 英文名稱: 末端多聚腺苷酸2蛋白抗體 0.2ml
BCL2L10 英文名稱: BCL2樣10促凋亡蛋白抗體 0.2ml
Ai-SHBG 性激素結(jié)合球蛋白抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Human thrombomodulin,TM ELISA Kit 人血栓調(diào)節(jié)蛋白Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-RELMa 抵抗素樣分子α抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh GYPB/CD235b 血型糖蛋白δ抗體 規(guī)格 0.2ml
大鼠抗IVIgG抗體ELISA Kit 大鼠抗IVIgG抗體 96T
OGFOD1 英文名稱: 末端多聚腺苷酸1蛋白抗體 0.2ml
BRSK1 英文名稱: 絲酸/蘇酸蛋白激酶SAD-B抗體 0.2ml
Ai-RELMa 抵抗素樣分子α抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Human Thrombopoietin,TPO ELISA kit 人血小板生成素Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-SCG3/SgIII 分泌粒蛋白3抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh GRAMD3/NS3TP2 丙型肝炎病毒-NS3反轉(zhuǎn)錄激活蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml
ASMA(Mouse Ai-Smooth Muscle Aibody) ELISA Kit 小鼠抗平滑肌抗體 96T
F-36P人白血病細胞ODZ3 英文名稱: 固生蛋白3抗體 0.2ml
Brs3 英文名稱: 蛙皮素受體3抗體 0.1ml
Ai-SCG3/SgIII 分泌粒蛋白3抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Human Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit 人纖溶抑制因子/酶激活的纖溶抑制物Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-RelB 核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh GYG2 糖原蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml
GMP-140(Mouse alpha-granular membrane protein) ELISA Kit 小鼠血漿α顆粒膜蛋白 96T
ODZ1 英文名稱: 固生蛋白M抗體 0.2ml
Bestrophin 2 英文名稱: 卵黃狀黃斑病蛋白2抗體 0.2ml
Ai-RelB 核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng):取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
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