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人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;TE671 Subline No.2
貨號 | AXB6172 | 規(guī)格 | 1×106 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | CCD-1068Sk人乳腺癌細(xì)胞 | 貨號 | AXB6172 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | CCD-1068Sk |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
細(xì)胞凍存注意事項:
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候,這時細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Cr ELISA Kit 大鼠骨膠原交聯(lián)Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-YAP1 原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh G protein beta subunit like G蛋白β樣蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
MDC/CCL22(Mouse Macrophage-Derived Chemokine) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子 96T
Nkx2.2 英文名稱: NK2轉(zhuǎn)錄樣蛋白B抗體 0.1ml
ARFRP1 英文名稱: ADP核糖基化因子相關(guān)蛋白1 0.1ml
Anti-YAP1 原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit 人N-乙?;?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-srGAP3 精神障礙相關(guān)GAP蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗人IgM 規(guī)格 0.1ml
ADP(Mouse adiponectin) ELISA Kit 小鼠脂聯(lián)素 96T
NKR2B4 英文名稱: CD244自然殺傷細(xì)胞受體2B4抗體 0.1ml
Bax 英文名稱: Bax 0.1ml
Anti-srGAP3 精神障礙相關(guān)GAP蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
TGF Beta2 ELISA Kit 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-TLK1 (Ser695) 0酸化調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GLUT8 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體 規(guī)格 0.2ml
CCD-1068Sk人乳腺癌細(xì)胞CCSA-3(Human colon cancer-specific antigen-3) ELISA kit 人大腸癌專一抗原3 96T
NKp80 英文名稱: 細(xì)胞毒性受體NK-p80抗體 0.2ml
ANTXR2 英文名稱: 毒素受體2抗體 0.2ml
Anti-Phospho-TLK1 (Ser695) 0酸化調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
AQP-4 ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti- Beta-arrestin 1/FITC 熒光素標(biāo)記β-抑制蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FPR3/Lipoxin A4 receptor 甲酰肽受體3抗體(脂氧素A4受體) 規(guī)格 0.2ml
IL-1sR II (Human soluble interleukin-1 receptor II ) ELISA kit 人白介素1可溶性受體Ⅱ 96T
NKG2D 英文名稱: NK細(xì)胞受體2D抗體 0.1ml
Aurora B 英文名稱: 有絲分裂激酶B抗體 0.1ml
Anti- Beta-arrestin 1/FITC 熒光素標(biāo)記β-抑制蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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