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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞系>>人細(xì)胞系>> 1.1B4 人胰腺癌細(xì)胞
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;TE671 Subline No.2
貨號(hào) | AXB6103 | 規(guī)格 | 1×10? cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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公司所有產(chǎn)品均不得用于人類(lèi)或動(dòng)物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品介紹:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 1.1B4 人胰腺癌細(xì)胞 | 貨號(hào) | AXB6103 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | 1.1B4 |
分類(lèi) | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1) 細(xì)胞的收獲
用來(lái)凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候,這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來(lái)凍存的細(xì)胞開(kāi)始時(shí)方法和平時(shí)一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬(wàn) 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過(guò)度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō),每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí),再放入 -80℃冰箱過(guò)夜(如果沒(méi)有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過(guò)大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時(shí),吸除無(wú)血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過(guò)表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品:
DA ELISA Kit 大鼠多巴胺Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
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Anti-ULBP1/N2DL1 UL16結(jié)合蛋白1蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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Agpat2 英文名稱(chēng): 溶血0脂酸酰基轉(zhuǎn)移酶β抗體 0.2ml
Anti-VDCC-L alpha L-型電壓依賴型鈣通道α抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Human ox-LDL ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-SSTR3 受體3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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CETP ELISA Kit 大鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白 96T
NANOGP8 英文名稱(chēng): 干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子NANOGP8抗體 0.2ml
BAP31 英文名稱(chēng): BAP31蛋白抗體 0.1ml
Anti-SSTR3 受體3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
RBP ELISA Kit 大鼠結(jié)合蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-TBX18 轉(zhuǎn)錄因子Tbx18抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Bovine IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的羊抗IgG 規(guī)格 0.1ml
U-TSH ELISA Kit 大鼠高靈敏度促甲狀腺激素 96T
Nanog 英文名稱(chēng): 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 0.1ml
1.1B4 人胰腺癌細(xì)胞BrdU 英文名稱(chēng): 溴脫氧尿苷抗體 0.1ml
Anti-TBX18 轉(zhuǎn)錄因子Tbx18抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PEDF ELISA Kit 大鼠色素上皮衍生因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-TSHR (CT) 促甲狀腺素受體抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GFR Alpha-1 GDNF家族受體α-1抗體 規(guī)格 0.1ml
Bcl-2(Mouse B-cell leukemia/lymphoma 2) ELISA KIT 小鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2 96T
NALP6 英文名稱(chēng): 富含亮酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 0.2ml
ABCA9 英文名稱(chēng): 三0酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9抗體 0.2ml
Anti-TSHR (CT) 促甲狀腺素受體抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
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