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規(guī)格 | 1×10? cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號 | A01X998 |
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商品介紹:
產(chǎn)品名稱 | TJ905人腦膠質(zhì)瘤 | 貨號 | A01X998 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | TJ905 |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態(tài)好,細胞數(shù)量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
IL-9 ELISA Kit 大鼠白介素9Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-arfaptin 1/FITC 熒光素標記ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM151A FAM151A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
B7-2/sCD86(Human soluble Cluster of differentiation 86) ELISA Kit 人可溶性CD86 96T
Music Acetylcholine receptor M3 英文名稱: 毒蕈堿型乙酰受體M3抗體 0.1ml
ANKK1 英文名稱: 錨定蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白激酶ANKK1抗體 0.2ml
Anti-arfaptin 1/FITC 熒光素標記ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
NN-T4 ELISA Kit 大鼠新生甲狀腺素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ATPase Na+/K+protein/FITC 熒光素標記ATP酶通道蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh F-Actin 纖維狀肌動蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
sCD30(Mouse soluble cluster of differentiation 30) Elisa Kit 小鼠可溶性CD30 96T
music Acetylcholine Receptor 1 英文名稱: 毒蕈堿型乙酰受體M1抗體 0.1ml
Gamma-Adaptin 英文名稱: 銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體 0.1ml
Anti-ATPase Na+/K+protein/FITC 熒光素標記ATP酶通道蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
p53(Mouse p53/tumor protein) ELISA Kit 小鼠p53Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-SLAMF6/LY108/FITC 熒光素標記SLAMF6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的驢抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml
Beta2-MG β2-微球蛋白 96T
Musclin 英文名稱: 肌肉素抗體 0.2ml
ACBD4 英文名稱: ?;Y(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 0.2ml
Anti-SLAMF6/LY108/FITC 熒光素標記SLAMF6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
HABP(Mouse Hya]uronate binding protein) ELISA Kit 小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CCL14/HCC-1/FITC 熒光素標記嗜酸粒細胞趨化蛋白14抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EFHA1 EFHA1蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Fish Oste ocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit 魚骨鈣素/骨谷酸蛋白 96T
Musashi 1 英文名稱: 神經(jīng)干細胞RNA結(jié)合蛋白Musashi1抗體 0.2ml
TJ905人腦膠質(zhì)瘤ATIC 英文名稱: AICAR甲?;D(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
Anti-CCL14/HCC-1/FITC 熒光素標記嗜酸粒細胞趨化蛋白14抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
BK(Mouse bradykinin) ELISA Kit 小鼠血管舒緩激肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD79A/IGBP-1 /FITC 熒光素標記免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DPF2/D4 zinc and double PHD fingers family 2 雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml
CMV 巨細胞病毒 IgG(間接法二步法)
MURF3 英文名稱: 肌肉特異性環(huán)指蛋白3抗體 0.2ml
ALAD 英文名稱: δ基乙酰脫水酶抗體 0.2ml
Anti-CD79A/IGBP-1 /FITC 熒光素標記免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng):取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
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