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貨號 | AXB6741 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
產(chǎn)品名稱 | TE-10人食管癌細胞 | 貨號 | AXB6741 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | TE10:TE-10 |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹:
別稱 | TE10 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
生長培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態(tài)好,細胞數(shù)量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Mouse phosphatidylserine,PS ELISA Kit 小鼠0脂酰絲Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-BGP/FITC 熒光素標記骨保護蛋白/骨鈣素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ER-beta 雌激素受體β 抗體 規(guī)格 0.1ml
HDL ISA Kit 大鼠高密度脂蛋白 96T
MMS21 英文名稱: E3連接酶MMS21蛋白抗體 0.2ml
ART4 英文名稱: 二0酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶4抗體 0.2ml
Anti-BGP/FITC 熒光素標記骨保護蛋白/骨鈣素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse reduced glutathione,GSH ELISA Kit 小鼠還原型Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-BRAF/FITC 熒光素標記黑素瘤相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EphB1+EphB2 酪蛋白激酶受體B1+B2抗體 規(guī)格 0.2ml
AmAC-1(Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1) ELISA Kit 人巨噬細胞替代激活相關(guān)化學因子1 96T
MMS19 英文名稱: DNA修復(fù)甲基磺酸敏感性基因19抗體 0.2ml
ARMC3 (Cancer/testis antigen 81) 英文名稱: /抗原81抗體 0.2ml
Anti-BRAF/FITC 熒光素標記黑素瘤相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
P III NT ELISA Kit 大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Adiponectin/FITC 熒光素標記脂聯(lián)素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FES 原癌基因酪蛋白激酶FES抗體 規(guī)格 0.2ml
SCFR(Human Stem Cell Factor Receptor) ELISA kit 人干細胞因子受體 96T
MMRN1 英文名稱: 內(nèi)皮細胞MMRN1蛋白抗體 0.2ml
ANKRD1 英文名稱: 心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體 0.2ml
Anti-Adiponectin/FITC 熒光素標記脂聯(lián)素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
NA ELISA Kit 大鼠去甲Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ASIC1/BNaC2/FITC 熒光素標記酸敏感離子通道1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM120C 構(gòu)成激活過氧化酶活化增生受體γ樣蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml
SDF-1a/CXCL12(Human Stromal cell derived factor 1a) ELISA Kit 人基質(zhì)細胞衍生因子1a 96T
MMP9 英文名稱: 基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體 0.1ml
TE-10人食管癌細胞ALDH9A1 英文名稱: γ-基醛脫氫酶抗體 0.2ml
Anti-ASIC1/BNaC2/FITC 熒光素標記酸敏感離子通道1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TGF- Beta1 ELISA kit 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Aurora C /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠、、兔、豬有絲分裂激酶B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EXPB-2 植物延展素-β 規(guī)格 1ml
MIGF/CXCL9(Human monocyte interferon gamma inducing factor) ELISA Kit 人γ干擾素誘導(dǎo)單核細胞因子 96T
MMP-9 英文名稱: 基質(zhì)金屬蛋白酶9抗體 0.1ml
Aquaporin 2 英文名稱: 水通道蛋白-2抗體 0.1ml
Anti-Aurora C /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠、、兔、豬有絲分裂激酶B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng):取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
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