您好, 歡迎來(lái)到儀表網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>抑制劑激活劑>> P-selectin抑制劑(PSI-697)
貨號(hào) | FS-X10892 |
---|
中文名稱(chēng):P-selectin抑制劑(PSI-697)
英文名稱(chēng):PSI-697
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號(hào):FS-X10892
產(chǎn)品介紹:
PSI-697是一個(gè)P-selectin抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):851546-61-7 別名:P-Selectin Inhibitor 純度:98.24% 分子量:367.83 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
果生鏈核盤(pán)菌大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體ⅡAnti-STEA2 Antibody人淋巴功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)
根瘤菌大鼠腫瘤壞死因子βAnti-STEAP3 Antibody人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)
炭疽芽孢桿菌人沙眼衣原體Anti-STIM2 Antibody人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)
葡萄座腔菌人S0鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白BAnti-STIM2 Antibody人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(lèi)(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)
擬盤(pán)多毛孢Y9大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3Anti-STK Antibody人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(lèi)(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)
唐菖蒲伯克霍爾德氏菌人S0鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白AAnti-STK17B Antibody人載脂蛋白A1(apo-A1)
白丘鏈霉菌大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1Anti-STK17B Antibody人載脂蛋白A1(apo-A1)
球孢白僵菌人前病整合位點(diǎn)1Anti-STK24 Antibody人載脂蛋白B0(apo-B0)
根瘤菌大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4Anti-STK32C Antibody人載脂蛋白B0(apo-B0)
Tarimoccocus大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體Anti-STK33 Antibody人白血病抑制因子受體(LIFR)
密枝瑚菌人綠膿桿菌外AAnti-STK24 Antibody人白血病抑制因子受體(LIFR)
根瘤菌人流感病AAnti-STK36 AntibodyA(IgA)
魯氏不動(dòng)桿菌大鼠尿激型纖溶原激活物Anti-STMN3 AntibodyA(IgA)
雷斯廷加假絲酵母大鼠尿激型纖溶原激活物受體Anti-STMN3 AntibodyG(IgG)
釀酒酵母人乙型肝炎表面抗原Anti-STK38L AntibodyG(IgG)
硫磺菌人抗乙型肝炎病核心抗體Anti-STMN4 AntibodyM(IgM)
髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子1抗體鏈格孢菌人腎臟腫瘤細(xì)胞
髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體根瘤菌雜交瘤(B類(lèi))
端粒相關(guān)蛋白2/端粒逆轉(zhuǎn)錄抗體白囊耙齒菌(斜面)抗人肝癌單抗HAb187
血小板反應(yīng)蛋白2/凝血敏感蛋白2抗體串珠鐮孢菌抗人環(huán)孢菌A-17
P-selectin抑制劑(PSI-697)葡萄座腔 釕/Ru過(guò)氧化
委內(nèi)瑞拉鏈霉 銠/Rh錳超氧化物歧化
土曲霉原變種 1,5-二氨基蒽醌垂草扁桃
枯草芽孢桿 錸/Re塞尼卡病抗體
土生空?qǐng)F(tuán)* 鉑/Pt雌受體α
大豆慢生根瘤 苝-3,4,9,-四羧二酐雌受體β
金黃色葡萄球 鈀/PdD-乳糖
大腸桿 六氟磷苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷副結(jié)核病
變化考克氏 鉛/Pb新城疫
釀酒酵母 總磷/P病
茄勞爾氏 磷/P趨化
pTRV 2 蒽醌-1-磺鈉鈣調(diào)蛋白激Ⅱ
魚(yú)蛉假絲酵母 鎳/Ni蛋白激C
湖北擬酵母 2,6-二叔丁基蛋白激C
巨大芽胞桿 鈮/Nb胃蛋白a
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買(mǎi)風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買(mǎi)產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。