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核轉(zhuǎn)運受體importin-β抑制劑(Importazole)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-23 15:36:56瀏覽次數(shù):170次

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貨號 FS-X10893
核轉(zhuǎn)運受體importin-β抑制劑(Importazole)正在熱銷的產(chǎn)品:Human Agrin ELISA Kit 人聚集蛋白蕓香葉 98%
Human Agouti Related Protein,AGRP ELISA Kit 人Agouti相關(guān)蛋白蕓香葉 ,≥98%
Human membrane cofactor protein,MCP ELISA Kit 人膜輔蛋白L-鼠李糖

中文名稱:核轉(zhuǎn)運受體importin-β抑制劑(Importazole)

英文名稱:Importazole

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg|200mg

貨號:FS-X10893

產(chǎn)品介紹:

Importazole是核轉(zhuǎn)運受體importin-β的小分子抑制劑。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:662163-81-7

純度:99.20%

分子量:318.42

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

烯霉鏈霉菌大鼠白介12Anti-STON1 AntibodyM(IgM)

淺絳紅鏈霉菌人抗乙型肝炎病核心IgM抗體Anti-STRADA Antibody人纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)

節(jié)桿菌屬大鼠血管內(nèi)皮生長因子BAnti-STRADA Antibody人纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)

釀酒酵母人抗乙型肝炎病表面抗體Anti-STRN Antibody人纖溶原激活物抑制因子(PAI)

平菇大鼠白介12Anti-STX1A Antibody人纖溶原激活物抑制因子(PAI)

釀酒酵母大鼠血管內(nèi)皮生長因子CAnti-STX2 Antibody人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)

放射形根瘤菌人抗乙型肝炎病e抗體Anti-SUCNR1 Antibody人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)

炭疽芽孢桿菌大鼠白介11Anti-SUGP2 Antibody人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)

玉黑粉菌人抗流行性出血熱病抗體IgMAnti-SUMO-3 Antibody人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)

大腸埃希氏菌人抗狂犬病抗體Anti-SUMO1P1 Antibody人血小板衍生生長因子(PDGF)

浸麻類芽孢桿菌大鼠胰島樣生長因子結(jié)合蛋白4Anti-SUPT20H Antibody人血小板衍生生長因子(PDGF)

泡盛曲霉人抗甲型肝炎病IgM抗體Anti-SUMO2/3 Antibody人血小板活化因子(PAF)

畢赤酵母大鼠胰島樣生長因子結(jié)合蛋白3Anti-SV2C Antibody人血小板活化因子(PAF)

枯草芽孢桿菌大鼠血管內(nèi)皮生長因子ti-SUPT3H Antibody人組織型纖溶原激活劑(t-PA)

李色鏈霉菌人抗甲型肝炎病IgG抗體Anti-SVOP Antibody人組織型纖溶原激活劑(t-PA)

根瘤菌屬人抗副流感病IgM抗體Anti-SURF1 Antibody人組織因子(TF)

血栓A2受體抗體大麗輪枝霉肌動蛋白結(jié)合蛋白1B單抗7

腱調(diào)蛋白抗體軟骨調(diào)節(jié)樣1蛋白亞炭角菌雜交瘤細(xì)胞CD25

四分子交聯(lián)體17抗體四旋蛋白大孢鏈格孢小鼠B淋巴細(xì)胞7

四分子交聯(lián)體15抗體四旋蛋白長柄鏈格孢(斜面)小鼠潘氏細(xì)胞雜交瘤
核轉(zhuǎn)運受體importin-β抑制劑(Importazole)沙氏乳桿 (S)-(-)-3-氨基吡咯烷胃蛋白c

茹氏短芽孢桿 鈉/Na總膽汁

柔毛鏈霉 磺苯甲酰乙型腦炎病抗體

燼灰鏈霉 鉬/MoN-羥乙酰神經(jīng)

糙孢籃狀 錳/MnI型膠原

居真細(xì) 2-氟-5-甲氧基苯II型膠原

肺炎克雷伯氏鼻硬結(jié)亞種 鎂/Mg緊密連接蛋白

類馬鏈球 羧乙基鍺倍半氧化物(GE 132)緊密連接蛋白1

釀酒酵母 鋰/Li內(nèi)脂

大腸埃希 /K線粒體呼吸鏈復(fù)合物I

Nocardiopsis 乙酰基二茂鐵流行性乙型腦炎病抗體

枯草芽孢桿 銥/Irα半乳糖抗原

黃色鏈霉 銦/In腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體

強(qiáng)酒海桿狀 二茂鐵甲蔗糖

枯草芽胞桿 鉿/Hf麥芽糖

 


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