5637 (人膀胱癌細(xì)胞)-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	A01X627	規(guī)格	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣	生長特性	貼壁細(xì)胞

公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

產(chǎn)品名稱	5637 (人膀胱癌細(xì)胞)	貨號	A01X627
規(guī)格	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶	英文名稱	5637:5637
分類	人細(xì)胞系	用途	僅供科研實驗

商品介紹：

鑒定	(STR鑒定正確)
種屬	人
生長特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮
培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）	生長培養(yǎng)基: RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 培養(yǎng)條件: 氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃
推薦傳代比例	1:3-1:4
推薦換液頻率	2-3次/周
注意事項	該細(xì)胞較難消化，注意延長消化時間，消化到細(xì)胞收縮變圓，輕拍培養(yǎng)瓶側(cè)邊，細(xì)胞可以滑落方可終止消化。

背景描述	5637細(xì)胞能生成SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。
年齡（性別）	男性；68歲
組織來源	膀胱；癌
細(xì)胞類型	腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型	膀胱癌細(xì)胞
生物安全等級	BSL-1
倍增時間	~24-36 hours
致瘤性	Yes, within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.
保藏機(jī)構(gòu)	ATCC; HTB-9 DSMZ; ACC-35

5637 (人膀胱癌細(xì)胞)

細(xì)胞凍存注意事項：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候，這時細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中，一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。

5637 (人膀胱癌細(xì)胞)

操作步驟:

(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。

(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)

A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。

B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。

分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。

(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。

(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。

(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。

(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達(dá)效率。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞	One-Step Firefly Luciferase Assay Kit（一步法螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒）
CoC1人卵巢癌細(xì)胞	D-Luciferin, Potassium Salt（D-螢光素鉀鹽）
COLO205人結(jié)腸癌細(xì)胞	D-Luciferin, Potassium Salt（D-螢光素鉀鹽）
COLO320人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞	D-Luciferin, Sodium Salt（D-螢光素鈉鹽）
COLO320 DM 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞	D-Luciferin, Sodium Salt（D-螢光素鈉鹽）
COLO320 HSR人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞	BCA 蛋白定量檢測試劑盒
COV434人卵巢顆粒腫瘤細(xì)胞	BCA 蛋白定量檢測試劑盒
CW-2人結(jié)腸癌細(xì)胞	BCA 蛋白定量檢測試劑盒（即用型）
cx-1結(jié)腸癌細(xì)胞	WonderOrange 蛋白定量試劑盒
D283 Med人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞	WonderOrange 蛋白定量試劑盒
D341 Med人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞	麗春紅染色液(1×)
DAMI人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞	考馬斯亮藍(lán)快速染色液（免脫色）
DAOY人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞	Western及IP細(xì)胞裂解液
DAUDI人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞	RIPA裂解液（強(qiáng)，無抑制劑）
DB人彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞	RIPA裂解液（強(qiáng)，無抑制劑）
DLD-1人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞	磷酸酶抑制劑混合液（EDTA-Free，100×）
DMS 53人肺癌細(xì)胞	磷酸酶抑制劑混合液（EDTA-Free，100×）
DMS 114人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞	5637 (人膀胱癌細(xì)胞)蛋白酶抑制劑混合液（EDTA-Free，100× in DMSO）