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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 二胺氧化酶(DAO)測(cè)試盒可見分光光度法
類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT)測(cè)試盒微量法
貨號(hào) | BJ-0161161-2 |
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商品介紹:
測(cè)定意義: DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動(dòng)物(腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等)、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛,其活性與核酸和蛋白合成密切相關(guān),能夠反映腸道機(jī)械屏障的完整性和受損傷程度。 測(cè)定原理: DAO催化尸胺產(chǎn)生醛和過氧化氫,外源添加過量的辣根過氧化物酶,催化過氧化氫氧化鄰聯(lián)茴香胺生成有色物質(zhì),在460nm處有特征吸收峰,通過測(cè)定該波長(zhǎng)吸光度增加速率,計(jì)算DAO活性。 需自備的儀器和用品: 天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水。 |
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
二胺氧化酶(DAO)測(cè)試盒可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | BJ-0161161-2 |
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
胚胎干關(guān)鍵蛋白抗體長(zhǎng)雙歧桿菌番茄紅su502-65-8
生長(zhǎng)抑su受體4抗體釀酒酵母丹皮甙72520-92-4
Smad4抗體Edaphobacter sp.dimethylcurcumin52328-98-0
Smad7抗體根瘤菌屬苦玄參苷IV184288-35-5
Shh信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路膜蛋白受體抗體膠孢烯26146-27-0規(guī)格
前列腺跨膜上皮1抗原抗體醋桿菌屬藍(lán)萼香茶菜甲su79498-31-0
雌激su調(diào)節(jié)蛋白LIV1/鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Corynebacterium variabile corrig. (Müller ) Collins 二氫白屈菜紅6880-91-7
垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因抗體病研所芽孢桿菌4-羥基156-38-7
豬水腫su(O139)菌體蛋白抗體米曲霉平展變種4,4'- methylenediphenol620-92-8
S-腺苷蛋an酸脫羧酶抗體姬松茸1號(hào)*人參皂苷RK2494753-69-4
5-羥色受體2B抗體木霉黃腐酚569-83-5
激活基因8抗體尖鐮孢白皮杉3葡萄糖苷94356-26-0
平滑肌肌球蛋白重鏈抗體豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS1817羥基sprengerinin C1029017-75-1
新型血小板相關(guān)血管內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE1抗體毛地黃皂苷11024-24-1規(guī)格
雙鏈RNA結(jié)合蛋白Staufen抗體蘇云金芽胞桿菌以色列亞種印度枸橘su13710-70-8
二胺氧化酶(DAO)測(cè)試盒可見分光光度法酪an酸激酶2(Tyk-2)試劑盒 Anti-FLT1 Antibody磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a
黑su瘤缺乏因子2(AIM2)試劑盒Anti-FLT1 Antibody抗表面S蛋白
自噬基因(BECN1)試劑盒 Anti-FLT1 Antibody突觸su/突觸相關(guān)蛋白-1
β干擾su(IFN-β)試劑盒Anti-FLT1 Antibodysu
嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵su家族成員1(EAR1)試劑盒 Anti-FLT1 Antibody可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白22A17
骨骼肌肌動(dòng)蛋白α1(ACTα1)試劑盒 Anti-FLT1(VEGFR1) Antibody磷酸化Src原癌基因
腫瘤壞死因子配體超家族成員14(TNFSF14)試劑盒Anti-FLT1 AntibodySH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌SHIP1
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