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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>糖異生系列>> 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)微量法
貨號(hào) | BJ-01611373-1 |
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱:磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)測(cè)試盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
貨號(hào):BJ-01611373-1
檢測(cè)方法:微量法
產(chǎn)品分類:糖異生系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月
商品介紹:
測(cè)定意義: PEPCK(EC 4.1.1.32)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和細(xì)胞中,催化草酰乙酸轉(zhuǎn)化為磷酸烯醇式丙酮酸,是調(diào)節(jié)糖異生途徑的關(guān)鍵酶。 測(cè)定原理: PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下測(cè)定NADH下降速率,即可反映PEPCK活性。 需自備的儀器和用品: 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
操作步驟:
本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
磷suan化KB抑制蛋白激酶α/β抗體多主葡萄殼菌戊二suan
磷suan化KB抑制蛋白激酶α/β抗體黑曲霉十二
纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白46抗體雜色曲霉2-乙酰吡啶
白介su-10受體a抗體無(wú)癸二suan二乙酯
白介su-13受體a1抗體門多薩假單胞菌檸檬suan銨
免疫相關(guān)鳥苷三磷suan酶基因抗體鴨疫里氏桿菌硼suan銨
白介su-13受體a2抗體埃里鏈格孢紅景天苷
嗜suan粒趨化蛋白CCL1抗體沃氏富鹽菌蓽茇
磷suan化胰島su樣生長(zhǎng)因子1受體抗體鮑姆木層孔菌祖師麻
胰島su降解酶抗體釀酒酵母嗎氯貝
白介su12抗體香菇加
白介su4抗體異配囊接霉原變種小鼠血紅su氧合酶1(HO-1)Elisa測(cè)定試劑盒
胰島su樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白9抗體膿腫分枝桿菌核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1
干擾su-gamma受體2抗體彎孢霉雌激su受體β 抗體流式免疫組化
白介su27受體抗體枯草芽孢桿菌胃泌su/蛙皮su
磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)測(cè)試盒微量法神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體3型(NTRK3)試劑盒Anti-CDK8 Antibody5
谷胱S轉(zhuǎn)移酶μ2(GSTμ2/GSTm2)試劑盒Anti-CDK9 Antibody抗Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)
血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGF-AA)試劑盒Anti-CDKL1 AntibodyⅢ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)
小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)試劑盒Anti-CDKL2 AntibodyIV型膠原(Collagen Ⅳ Ⅳ 型膠原)
自身調(diào)節(jié)因子(AIRE)試劑盒Anti-CDKL4 AntibodyI型膠原蛋白
前列腺su內(nèi)過(guò)氧化物合酶1(PTGS1)試劑盒Anti-CDKL3 AntibodyⅤ型膠原(多肽)
多肽YY (PYY)試劑盒Anti-CDKN1C Antibody緊密連接蛋白1抗原
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
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