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貨號(hào) | BJ-01611379-2 |
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱:糖原磷酸化酶b(GPb)測(cè)試盒紫外分光光度法
規(guī)格:50管/24樣
貨號(hào):BJ-01611379-2
檢測(cè)方法:紫外分光光度法
產(chǎn)品分類:糖原系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月
本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
商品介紹:
測(cè)定意義: 糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關(guān)鍵酶,使糖原分子從非還原端逐個(gè)斷開α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點(diǎn)前4個(gè)葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和無活性的糖原磷酸化酶b(GPb)兩種形式。GPb在一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。 測(cè)定原理: GP催化糖原和無機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測(cè)定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)時(shí)測(cè)定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)時(shí)測(cè)定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
白介su-17抗體蠟狀芽孢桿菌乙酰酯酶
白介su-18/干擾suγ誘導(dǎo)因子抗體弗氏志賀氏菌蔗糖磷suan化酶
白介su1受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白抗體美澳型核果褐腐病菌蛋白A
白介su1β/IL-1β抗體藤黃微球菌菌suC鋅鹽
白介su2抗體(大、小鼠)單核增生李斯特CMCC(B)54002鹽suan土霉su
白介su-2單克隆抗體綠穗霉2′-脫氧尿苷-5′-單磷suan二鈉鹽
白介su-23抗體尼氏芽孢桿菌2′-甲氧基尿苷
白介su4抗體漢遜德巴利酵母fabryi變種無水氯化鈷
白介su6香菇(泌陽3號(hào))聚乙二6000
白介su6抗體球孢白僵菌乙二
白介su6抗體平臍蠕孢菌1,3-丁二
抑制suA/Inhibin α抗體空泡單胞菌無水磷suan肌suan二鈉鹽
傳染性喉氣管炎病糖蛋白E抗體產(chǎn)氣腸桿菌(現(xiàn)1)無水偏釩suan鈉
小腸型脂肪suan結(jié)合蛋白抗體布魯氏菌偏重亞硫suan鈉
白介su-7受體a抗體不規(guī)則鹽海菌3-氨基苯乙酮
糖原磷酸化酶b(GPb)測(cè)試盒紫外分光光度法成纖維生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(FGFBP2)試劑盒Anti-CHPF AntibodyE2 tag多肽抗原
紅激因子(ESF)試劑盒 Anti-CHPF2 Antibody膠質(zhì)谷ansuan運(yùn)載蛋白3抗原
肝臟膠原凝集su1(CLL1)試劑盒 Anti-CHPF2 AntibodyEB病編碼核蛋白-3
角質(zhì)轉(zhuǎn)谷氨酰酶(TGM1)試劑盒Anti-CHPF Antibody內(nèi)皮su轉(zhuǎn)化酶1抗原
絲ansuan蛋白mei8(PRSS8)試劑盒Anti-CHRD Antibody內(nèi)皮su轉(zhuǎn)化酶2抗原
蛋白二硫化物異構(gòu)酶A2(PDIA2)試劑盒Anti-CHRNA10 Antibody嗜suan性粒陽離子蛋白抗原
外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶3(ERK3)試劑盒Anti-CHRAC1 Antibody外胚層發(fā)育不良抗原
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