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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>糖異生系列>> 葡萄糖6磷酸酶(G6P)外分光光度法
貨號(hào) | BJ-01611374-2 |
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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:葡萄糖6磷酸酶(G6P)測(cè)試盒紫外分光光度法
規(guī)格:50管/48樣
貨號(hào):BJ-01611374-2
檢測(cè)方法:紫外分光光度法
產(chǎn)品分類:糖異生系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月
商品介紹:
測(cè)定意義: 葡萄糖-6-磷酸酶((glucose 6 phosphatase,G6Pase,EC 3.1.3.9)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和細(xì)胞中,是糖異生過程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶,在保證血糖的動(dòng)態(tài)平衡方面起著重要的作用。 測(cè)定原理: G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖,變旋酶和葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NAD+還原生成NADH,在340nm下測(cè)定NADH生成速率,即可反映G6P活性。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
操作步驟:
本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
干擾su誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白3抗體熒光假單胞菌六甲基磷酰三
干擾su誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白5抗體基利恩帚枝霉1,5-萘二磺suan四水物
干擾su誘導(dǎo)跨膜蛋白2抗體異常威克漢姆酵母氯化鈰
干擾su誘導(dǎo)跨膜蛋白5抗體金針菇F8909植suan鈉
干擾sualpha/beta 受體1蛋白抗體枯草芽孢桿菌二乙基二硫代氨基甲suan鈉
干擾sugamma受體1蛋白抗體犁頭霉屬溴代十六烷
真核翻譯起始因子3亞基L蛋白抗體枯草芽孢桿菌對(duì)甲苯磺suan乙酯
干擾su誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白2抗體黑曲霉磷suan烯丙酮suan單環(huán)己銨鹽
干擾su誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白1B抗體賴ansuan芽胞桿菌屬溴化亞銅
160kDa內(nèi)含子結(jié)合蛋白抗體棉盤孢2-萘基硫脲
Bruton酪ansuan激酶抑制劑蛋白抗體蘋果黑腐皮殼丙ansuan
γ干擾su誘導(dǎo)蛋白IP30抗體米曲霉羥基積雪草苷
中間絲家族孤啡肽1蛋白抗體擴(kuò)展青霉川續(xù)斷皂苷 Ⅵ (木通皂苷 D)
內(nèi)臟器官發(fā)育轉(zhuǎn)位相關(guān)蛋白NPH2抗體金灰青霉十七碳suan甲酯
胰島su受體β抗體裂褐層孔菌柳穿魚葉苷
葡萄糖6磷酸酶(G6P)測(cè)試盒紫外分光光度法G蛋白β1(GNβ1)試劑盒Anti-CDYL2 AntibodyMEK1/MAPKK1(N-端)
鈣調(diào)磷suan酶結(jié)合蛋白1(CABIN1)試劑盒 Anti-CEACAM21 Antibody促腎上腺皮質(zhì)釋放因子
Apelin 17(AP17)試劑盒 Anti-CEBP Delta Antibody衰老抑制基因抗原
蛋白激酶D1(PKD1)試劑盒Anti-CEBPD Antibody環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原
谷ansuan脫羧酶2(GAD2)試劑盒Anti-CEBPD Antibody降鈣su抗原
色suP450家族成員1A2(CYP1A2)試劑盒 Anti-CEBPE AntibodyC端結(jié)合蛋白1抗原
神經(jīng)膠質(zhì)纖維suan性蛋白(GFAP)試劑盒Anti-CEBPE Antibody相關(guān)抗原4/性T抗原-4
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
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