當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>三羧酸循環(huán)系列>> 丙酮酸脫氫酶(PDH)測試盒可見分光光度法
貨號 | BJ-01611143-2 |
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優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
丙酮酸脫氫酶(PDH)測試盒可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01611143-2 |
商品介紹:
測定意義PDH(EC 4.1.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是丙酮酸脫氫酶復合體(PDHC)催化丙酮酸氧化脫羧的限速酶,催化丙酮酸脫梭生成羥乙ji-TPP,把糖酵解和三羧酸循環(huán)連接起來。測定原理PDH催化丙酮酸脫氫,同時還原WST-8產(chǎn)生黃色物質(zhì),從而導致450nm光吸收的增加。 需自備的儀器和用品可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復凍融導致的檢測效果下降。
標準品稀釋時所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
絲an酸蛋白mei/線粒體絲an酸蛋白mei多肽抗原葡萄穗霉豬蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)elisa定量檢測試劑盒
離子鈣接頭蛋白抗原 華麗側(cè)耳(佛羅里達側(cè)耳)豬骨粘連蛋白(ON)elisa定量檢測試劑盒
小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原水稻節(jié)桿菌豬去甲腎上腺su(NA/NE)elisa定量檢測試劑盒
干擾su誘導跨膜蛋白1抗原青春雙歧桿菌豬蛋白激酶抑制劑γ(PKIγ)elisa定量檢測試劑盒
干擾su-α抗原(人)枯草芽孢桿菌豬紅激因子(ESF)elisa定量檢測試劑盒
干擾su-gamma受體1抗原乳酸鏈球菌豬唾液酸(SA)elisa定量檢測試劑盒
胰島su樣生長因子結(jié)合蛋白-2(多肽)金黃桿菌屬豬天門冬an酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)elisa定量檢測試劑盒
胰島su樣生長因子結(jié)合蛋白-3抗原泛酸枝芽胞桿菌豬三葉因子1(TFF1)elisa定量檢測試劑盒
胰島su樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗原魯氏毛霉猴趨化su樣因子超家族成員5(CKLFSF5)elisa定量檢測試劑盒
KB抑制蛋白β(多肽)空泡單胞菌猴血小板膜糖蛋白IV (GP4/CD36)elisa定量檢測試劑盒
KB抑制蛋白α抗原假單胞菌豬半胱天冬酶3(P3)elisa定量檢測試劑盒
白介su12抗原(白介su-12)豇豆慢生根瘤菌豬高爾基蛋白73(GP-73)elisa定量檢測試劑盒
白介su12抗原(人)拉考夫梅奇酵母 豬信號傳導轉(zhuǎn)錄激活因子1(STAT1)elisa定量檢測試劑盒
白介su-12受體β2抗原假諾卡氏菌豬鈣腔蛋白(CALU)elisa定量檢測試劑盒
白介su13抗原木霉屬豬胱天蛋白mei10(P10)elisa定量檢測試劑盒
丙酮酸脫氫酶(PDH)測試盒可見分光光度法苯酸諾龍/苯酸去(NP)試劑盒Anti-MAD1L1 Antibody(PB0258)轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白3
腦多巴神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)試劑盒 Anti-MADCAM1 Antibody轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白1
糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)試劑盒 Anti-MAD2L1 Antibody病抑制蛋白Viperin
胰腺癌標志物(CA242)試劑盒Anti-MAdCAM1 Antibody血管假性血友病因子/血管性血友病因子
血清樣蛋白P(SAP)試劑盒 Anti-MAFA Antibody血管內(nèi)皮生長因子B167
白分化抗原CD109(CD109)試劑盒 Anti-MAF Antibody血管內(nèi)皮生長因子B
血小板衍生生長因子受體α(PDGFRα)試劑盒Anti-MAFA Antibody01群稻葉型霍亂弧
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