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當(dāng)前位置：上海邦景實業(yè)有限公司>>PCR相關(guān)試劑>>miRNA檢測系列>> 一步法miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒
| 產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 加工定制 | 否 |
|---|---|---|---|
| 適用領(lǐng)域 | 科研 |
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品分類 | 規(guī)格 | 貨號 |
一步法miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒 | miRNA檢測系列 | 25T 100TX20μl | BJ-PJ6641 |
描述：由于 miRNAs 分子序列較小，僅 20nt 左右，沒有 真核生物有的 Poly(A)尾巴結(jié)構(gòu)，采用傳統(tǒng) Oligo dT 引 物和隨機引物很難獲得從 miRNA 到 cDNA 的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn) 物。 公司開發(fā)出一套全新的加 A 法 miRNA 反轉(zhuǎn) 錄試劑盒，基于 Peter 改良的 miR-Q 技術(shù)， 可以對成熟的 miRNA 同時完成加 A 反應(yīng)和反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)， 直接獲得含有特異性 tag 和 15(T)的 cDNA 產(chǎn)物（如圖 1 所示）。該方法使得 miRNA 反轉(zhuǎn)錄與 mRNA 的反轉(zhuǎn)錄一 樣輕松。直接將提取的 miRNA 與反應(yīng)緩沖液混合物混合， 并置于 PCR 儀上 1 小時即可獲得高濃度的、包含所有 miRNAs 分子的 cDNA 產(chǎn)物。獲得的 cDNA 產(chǎn)物適用于 HG miRNA 熒光定量 PCR 試劑盒進(jìn)行定量檢測，該方法 已被大量文獻(xiàn)所采用。
儲存：請置于-20°C，可保存 2 年；避免反復(fù)凍融
操作方法
1. 按以下組分配制反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液
miRNA（0.01-0.1 μg）or Total RNA 0.1-2 μg
4×One step miRNA RT Solution 5 μl
*10×miRNA RT Primer 2 μl
Rnase Free H2O Up to 20 μl
*特別說明： 10×miRNA RT Primer 引物為
5’-CAGGTCCAGTTTTTTTTTTTTTTTVN-3’，定量擴(kuò)增
用特異性上下游引物進(jìn)行擴(kuò)增，圖 2 是以 hsa-miR-21 為
實例說明特異性上下游引物的設(shè)計方法
2. 在 PCR 儀上按以下條件進(jìn)行反應(yīng):
37°C 60min
95°C 5min
3. 獲得 cDNA 產(chǎn)物后使用 HG miRNA 熒光定量 PCR 試劑盒進(jìn)行 miRNA 定量檢測。
下列是公司正在出售的產(chǎn)品：
鋅指蛋白426抗體 英文名；ZNF426 | 纖維母細(xì)胞生長因子6抗體 英文名；FGF6 |
白介素1α/IL-1α抗體 英文名；IL-1 Alpha Propeptide | TWIK相關(guān)酸敏感鉀離子通道蛋白9抗體 英文名；KCNK9 |
DFFA抗體 | 淋巴增強因子-1單克隆抗體 |
磷酸化間變性淋巴瘤激酶核相互作用伴侶蛋白抗體 英文名；phospho-NIPA (Ser354) | ATRNL1蛋白抗體 |
Dermokine β蛋白抗體 英文名；Dermokine beta | 酪蛋白硫酸轉(zhuǎn)移酶1抗體 英文名；TPST1 |
戊型肝炎病毒ORF2抗原抗體 英文名；Hepatitis E Virus ORF2 antigen | ATP依賴性解旋酶ATRX抗體 英文名；ATRX |
RNA結(jié)合蛋白26抗體 英文名；RBM26 | 碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移酶11抗體 英文名；CHST11 |
金屬蛋白酶組織抑制因子-4抗體 | PerCP標(biāo)記的腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPK α 1抗體 英文名；AMPK alpha-1, PerCP conjugated |
AF647標(biāo)記的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5抗體 | 肌微管素相關(guān)蛋白12抗體 |
膠原蛋白和鈣結(jié)合表皮生長因子結(jié)構(gòu)域1抗體 英文名；CCBE1 | 20號染色體開放閱讀框166抗體 |
AF647標(biāo)記的網(wǎng)格蛋白重鏈抗體 英文名；Clathrin heavy chain, Alexa Fluor 647 conjugated | 肌動蛋白樣蛋白6B抗體 英文名；BAF53b |
線粒體核糖體蛋白L9抗體 | 20號染色體開放閱讀框165抗體 英文名；C20orf165 |
鋅指蛋白674抗體 | 一步法miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒磷酸化上皮鈣粘附分子抗體 |
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