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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0919操作步驟

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更新時間:2017-01-21 13:29:03瀏覽次數(shù):319次

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產(chǎn)品名稱EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0919操作步驟
貨期3-5天
發(fā)貨地上海

細胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0919操作步驟
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞系來源于一重度少精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS
傳代方法  1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0919操作步驟操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0919操作步驟溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學(xué)研究提供實驗細胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任,采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。

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