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轉(zhuǎn)氫酶1微量法檢測(cè)試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-04-27 09:26:59瀏覽次數(shù):177次

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貨號(hào) GOY-01S6565
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測(cè)定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。

【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

轉(zhuǎn)氫酶1微量法檢測(cè)試劑盒

100管/96樣

微量法

GOY-01S6565

商品介紹

測(cè)定意義

TH位于線粒體的內(nèi)膜上,又稱為線粒體復(fù)合體六,催化NADH+NADP+NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化,調(diào)節(jié)線粒體NAD(H)NADP(H)平衡。把逆向反應(yīng)稱為TH-2,催化NADPHNAD+生成NADP+NADH。

測(cè)定原理:

NADHNADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應(yīng)不能導(dǎo)致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+,TH-2催化APAD+還原生成APADHAPADH375nm有特征光吸收,測(cè)定375nm光吸收的增加速率,來計(jì)算TH-2活性。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153443.png

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

① 組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取

② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;

2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般

將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。

甲基異丁酮 CP,98.0%氧化鏑 40nm 球形,99.5%Anti-KLF6/FITC  熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)染抑癌基因KLF6抗體IgG

AR,99.0%  氧化鏑 ≥99.9% metals basisAnti-KLF8/FITC  熒光素標(biāo)記KLF樣轉(zhuǎn)錄因子8抗體IgG

AR,99.0%金屬鏑 99.9% (REO)Anti-KLF9/FITC  熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體IgG

4-溴-2-氟苯甲 98%氟化鏑 99.99% metals basisAnti-KLF13/RFLAT-1 /FITC  熒光素標(biāo)記腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子13抗體IgG

1-溴-2-氟-4-苯 97%溴化鏑(III) 無水, 粉末, 99.99% metals basisAnti-KLK1/FITC  熒光素標(biāo)記激肽釋放1抗體IgG

2,5-二氯苯甲 98%化鏑(III) 無水, 鱗片, 99.99% metals basisAnti-KLK3/FITC  熒光素標(biāo)記激肽釋放3/3抗體IgG

3-氟苯 98%鏑(III),八水 99.9%Anti-KLK4/FITC  熒光素標(biāo)記激肽釋放4抗體IgG

L-天冬酰 一水合物  99%鏑(III) 99.99% metals basisAnti-KLK7/FITC  熒光素標(biāo)記激肽釋放7抗體IgG

轉(zhuǎn)氫酶1微量法檢測(cè)試劑盒位庚內(nèi)酯  Standard for GC ,>98.5% (GC)PE-Cy7標(biāo)記的兔抗馬IgM

椰子 98%PE-Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgM

椰子 98%, FCC, KosherPE-CY5標(biāo)記的兔抗馬IgM

丁位壬內(nèi)酯  98%PE-Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgG

丁位壬內(nèi)酯  98%, FCC, KosherCy5標(biāo)記的羊抗人IgM

位辛內(nèi)酯  99%FITC標(biāo)記的羊抗人IgM

位辛內(nèi)酯  98%, FCC,KosherFITC標(biāo)記的羊抗人IgG

丁位辛內(nèi)酯  98%膠體金標(biāo)記的羊抗人IgG

丁位十一內(nèi)酯 98%FITC標(biāo)記的兔抗人IgG

2- CP(劇品)辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗馬IgM

2- GR(劇品)Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgG

2- Standard for GC(劇品)Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗人IgG

99.95%,0.5mm 直徑PE標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體

99.95%,0.1mm 直徑辣根過氧化物標(biāo)記兔抗人IgA

9.95%,50μm 標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體

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