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3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)微量法檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-27 10:29:03瀏覽次數(shù):250次

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國產(chǎn)貨號 GOY-01S6611
3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)微量法檢測試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 1 規(guī)格: 0.1g 訂購|咨詢
唑螨酯;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 111812-58-9 規(guī)格: 0.1g 訂購|咨詢
克威;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品-丹;有證書 規(guī)格: 0.25g 訂購|咨詢
三聚胺;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 108-78-1 規(guī)格: 2g 訂購|咨詢
鈉;純品型

【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)微量法檢測試劑盒

100管/96樣

微量法

GOY-01S6611

商品介紹

測定意義

GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途徑的關(guān)鍵酶,與糖異生途徑、體內(nèi)血糖濃度的維持和糖尿病的發(fā)生密切相關(guān),在機(jī)體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發(fā)揮重要作用。

測定原理

3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、無機(jī)磷和NAD340nm處測定NADH的減少量可反映GADPH活性的高低。

需自備的儀器和用品

分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153443.png

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

① 組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取

② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;

2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般

將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通常可以使測定正常。

焦性沒食子酸 AR,98%氧化銠,水合 銠 55%Anti-LIF  白血病抑制因子抗體

焦性沒食子酸 >99.0%(GC)四氯鈀酸鈉  98%Anti-LIFR/CD118  白血病抑制因子受體抗體

沒食子酸酯 98%碳酸銀 CP,98.0%Anti-Lingo-1  Nogo受體反應(yīng)蛋白抗體

3,4,5-氧基苯甲酸 99%氯金酸鈉 金含量,48% Anti-LIMK1  單蛋白激1抗體

2,3,4-三羥基苯甲 98%銀 銀含量, 77.0 % Anti-Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505)  化單蛋白激1/2抗體

2,3,4-氧基苯甲 98%四(三苯基膦)鈀(0) 99.8% metals basis, Pd 9.0%Anti-LIR-6  白球蛋白樣受體6抗體

1,2,3-氧基苯 98%間氯 CP,98%Anti-LIR-8/CD85c/LILRB5  白球蛋白樣受體8抗體

2,3,4-氧基苯甲酸 97%間氯 GCS,>99.5%(GC)Anti-LIS1  無腦回的致病基因LIS1抗體

3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)微量法檢測試劑盒2-溴酰溴 97%環(huán)指蛋白138抗體

99%Nogo66受體相關(guān)蛋白3抗體

酰溴  95%Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體

皂土(膨潤土) Bentone SD-1,適于中至低性溶劑Rh血型C抗原抗體

皂土(膨潤土) Bentone SD-2,適于中高性溶劑RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體

BENTONE 27,應(yīng)用在中等到高等性溶劑Ras樣蛋白A抗體

皂土(膨潤土) BENTONE 38,應(yīng)用在性溶劑體系中衰老標(biāo)記蛋白30抗體

鋅粒 99.99% metals basis環(huán)指蛋白56

二二硒 99%受體活性修飾蛋白1抗體

 99%胞內(nèi)接頭蛋白P14抗體

鹽鹽 ≥99.0% (HPLC)RNA結(jié)合蛋白X-連鎖蛋白2抗體

6-硫 98%視網(wǎng)膜母瘤相關(guān)蛋白p130抗體

0.98化A-Raf抗體

 ≥99.5% (HPLC)環(huán)指蛋白10抗體

 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%(HPLC)RAN結(jié)合蛋白2/核孔蛋白抗體

測定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

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