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Y190 感受態(tài)細胞100ul*50規(guī)格
產(chǎn)地 | 進口 | 加工定制 | 否 |
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適用領(lǐng)域 | 其他 |
使用說明:
1. Y190 感受態(tài)細胞100ul*10品牌取100 μl感受態(tài)細胞置于冰浴中融化。
2.待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30min。
3. 42℃熱擊45sec,然后快速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3min,該過程不要搖動離心管。
4.每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床, 150 rpm振蕩培養(yǎng)45~60min使菌體復(fù)蘇。
5. 根據(jù)實驗需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞,加到含相應(yīng)抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12~16h。
培養(yǎng)方法:
Y190 感受態(tài)細胞100ul*10品牌收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況,如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
培養(yǎng)實驗又要開始了,科研工作者又該忙碌了,大家可能都在尋找適合自己的細胞,不用急,我們幫您掌舵,讓您滿意!
傳代方法:細胞*匯合時,倒掉舊液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉胰酶,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
96T0.156-10 ng/ml人相關(guān)抗原9(SPAG9) 抗體ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human C-Jun-amino-terminal kinase-interacting protein 4
96T31.2-2000 pg/mL人斯鈣素2(STC-2)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Stanniocalcin-2
96T0.312-20 ng/mL人絲氨酸蛋白酶抑制劑B6(Serpin B6)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Serpin B6
96T0.156-10 ng/mL人絲氨酸/精氨酸富有剪接因子3(SRSF3)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Serine/arginine-rich splicing factor 3
96T0.156-10 ng/mL人絲氨酸/精氨酸富有剪接因子2(SRSF2)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Serine/arginine-rich splicing factor 2
96T0.312-20 ng/mL人分選微管連接蛋白9(Sorting nexin-9)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Sorting nexin-9
96T0.156-10 ng/mL人沉默調(diào)節(jié)蛋白5(SIRT5)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human NAD-dependent deacetylase sirtuin-5
96T0.312-20 ng/mL人沉默調(diào)節(jié)蛋白7(SIRT7)ELISA試劑盒人
Y190 感受態(tài)細胞100ul*10品牌GDF15 ProteinHuman重組人 GDF-15 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
LEFTY2 ProteinHuman重組人 Lefty2 / Lefty A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NOG ProteinHuman重組人 Noggin / NOG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
BMP5 ProteinHuman重組人 BMP-5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
BMP2 ProteinHuman重組人 BMP-2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
腫瘤壞死因子
TNFSF11 ProteinCynomolgus重組食蟹猴 RANKL / OPGL / TNFSF11 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CD40LG ProteinCanine重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白
中文名稱:Y190 感受態(tài)細胞100ul*10品牌
規(guī)格:100ul*10
用途:生化試劑。(用于科研試驗研究)
儲存條件: -70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
外觀:(性狀) 干冰運輸,單加10kg干冰費
單位: 袋
操作方法:
一 、Y190 感受態(tài)細胞100ul*10品牌熱激轉(zhuǎn)化法
1. 從-80℃冰箱取出感受態(tài)細胞冰浴融化后,吸取100μl感受態(tài)細胞轉(zhuǎn)移到-20℃過夜預(yù)冷的搖菌管中,加入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物,輕輕混勻,冰浴30分鐘。
2. 42℃水浴熱激60秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,該過程不要搖動搖菌管。
3. 向搖菌管中加入900μl 37℃溫浴的SOC或LB(SOC培養(yǎng)基可提高2-3倍轉(zhuǎn)化效率),37℃、180rpm、45分鐘復(fù)蘇菌種。
4. 根據(jù)實驗要求(質(zhì)粒,重組連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化),吸取不同體積已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞加到含相應(yīng)抗生素的LB瓊脂培養(yǎng)基上,將細胞均勻涂開。將平板置于37℃至液體被吸收,倒置平 板,37℃過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
二、10分鐘快速轉(zhuǎn)化法
注:在使用卡那霉素,四環(huán)素等作為篩選抗性時,需要在SOC培養(yǎng)基中復(fù)蘇以提高轉(zhuǎn)化效率,當(dāng)使用氨芐青霉素作為篩選抗性時,該步驟可以省略。感受態(tài)細胞-DNA混合物在冰上孵育5-10分鐘后加入4倍體積的37℃溫浴的SOC培養(yǎng)基,在37℃ 180rpm孵育1小時,然后轉(zhuǎn)移到37℃預(yù)熱的LB培養(yǎng)基上。
1. 提前15分鐘將用到的篩選培養(yǎng)基平板拿到37℃預(yù)熱。
2. DH 5α感受態(tài)細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA并用手EP管底輕輕混勻,冰中靜置5分鐘。
3. 用200μl槍將感受態(tài)細胞-DNA混合物轉(zhuǎn)移到已經(jīng)37℃預(yù)熱的LB培養(yǎng)基上,涂均勻,表面無水漬。
4. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
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