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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>PCR類>>熒光定量PCR試劑盒>> 50次恙蟲病東方體PCR試劑盒

恙蟲病東方體PCR試劑盒

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產(chǎn)品型號50次

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-11-20 15:51:06瀏覽次數(shù):97次

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規(guī)格 50次 貨號 YS-P013533
品牌 YSRIBIO
恙蟲病東方體PCR試劑盒原理是由一對引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

服務(wù)流程:

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

恙蟲病東方體PCR試劑盒

50次

YS-P013533

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
QQ截圖20191211135002.jpg

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

豬泛素連接酶E3A (UBE3A)  3-磺炳十六烷二甜菜堿G蛋白偶聯(lián)受體21抗體

CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白γ(C/EBPγ) 聚氧烯月桂(Brij-35);Brij™ L23G蛋白偶聯(lián)受體22抗體

豬泛素分解酶(DUB)  十二烷硫酸鋰G蛋白偶聯(lián)受體25抗體

豬過氧化還原酶5(PRDX5)諾納德® P-40G蛋白偶聯(lián)受體26抗體

豬核孔蛋白133kda(NUP133)硫代甜菜堿 8G蛋白偶聯(lián)受體27抗體

豬中性粒堿性磷酸酶(NAP)硫代甜菜堿 10G蛋白偶聯(lián)受體3抗體

豬嗜酸粒趨化因子(ECF/CCL11)硫代甜菜堿 12G蛋白偶聯(lián)受體31抗體

豬脂蛋白脂酶(LPL)恩他卡朋;COMT抑制劑G蛋白偶聯(lián)受體32抗體

豬質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)曲拉通X-114G蛋白偶聯(lián)受體34抗體

豬核孔蛋白50kda(NUP50)曲拉通X-405G蛋白偶聯(lián)受體35抗體

豬生長因子受體結(jié)合蛋白7(Grb7)異硫酸胍G蛋白偶聯(lián)受體37/帕金森相關(guān)內(nèi)皮素受體樣受體抗體

豬血小板因子3(PF3)CHAPS;3-[3-(膽酰)二氨]-1-磺酸G蛋白偶聯(lián)受體40抗體

豬集蛋白亞家族成員11(COLEC11) CHAPSO;3-[(3-膽固氨)二氨]-2-羥-1-磺酸G蛋白偶聯(lián)受體43抗體

豬腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G1(ABCG1) 二硫赤蘚(DTE);1,4-二硫代赤蘚G蛋白偶聯(lián)受體44抗體

β葡萄糖酸酶(GUSβ) N-硝-L-精氨酸酯G蛋白偶聯(lián)受體45抗體

豬血小板親和蛋白1(PKP1)N-酰-L-酪氨酸酯(BTEE)同源盒蛋白GSC抗體
恙蟲病東方體PCR試劑盒RASSF1A  Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體單組份卡爾費(fèi)休試劑(測酮類樣 5ml,測水量較高樣品

Pan-ras  Pan ras抗體單組份卡爾費(fèi)休試劑(測酮類樣 2ml,測水量較小樣品

RCC1  染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體單組份卡爾費(fèi)休試劑(測酮類樣 1mg,測水量微小樣品

Phospho-RCC1 (Ser11)  磷酸化染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體單組份含吡啶卡爾費(fèi)休滴定劑 水/ml,測水量較高樣品

Rb/RB1 protein  視網(wǎng)膜母瘤相關(guān)蛋白1抗體單組份含吡啶卡爾費(fèi)休滴定劑 2/ml,測含水量較低樣品

Phospho-Rb (Ser608)  磷酸化視網(wǎng)膜母瘤相關(guān)蛋白1抗體單組份含吡啶卡爾費(fèi)休滴定劑 1ml,測含水量微小樣品

Phospho-Rb (Ser780)  磷酸化視網(wǎng)膜母瘤相關(guān)蛋白1抗體單組份滴定用溶劑(不含) 水分≤0.01%,用作反應(yīng)介質(zhì)

Phospho-Rb (Ser807/Ser811)  磷酸化視網(wǎng)膜母瘤相關(guān)蛋白1抗體單組份油類測定用溶劑 水分≤0.01%,測礦物油
反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。


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