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當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>PCR試劑盒>>PCR鑒定試劑盒>> 50次龍眼肉染料法PCR鑒定試劑盒規(guī)格

龍眼肉染料法PCR鑒定試劑盒規(guī)格

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產(chǎn)品型號50次

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所  在  地上海市

更新時間:2020-11-16 09:57:18瀏覽次數(shù):552次

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龍眼肉染料法PCR鑒定試劑盒規(guī)格原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:龍眼肉染料法PCR鑒定試劑盒規(guī)格
英文名稱:Arillus longan     
貨號:YSP8737
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
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適用范圍【參考值】
1.試劑盒有效性判定:
(1)陽性對照:有典型S型擴(kuò)增曲線或Ct值≤35。
(2)陰性對照:Ct值>38或無Ct值,線形為直線或輕微斜線,無指數(shù)增長期。
2.標(biāo)本結(jié)果判定:
(1)陽性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期。
(2)可疑:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值在35~38范圍內(nèi)。此時應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測,如重復(fù)實驗結(jié)果Ct值仍在35~38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增長期,則判定為陽性,否則為陰性。
(3)陰性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值>38或無Ct值。
  實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
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PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
1,4-烯二醇(反式+順式) 97%Biodyne尼龍轉(zhuǎn)印B膜正電6,6 0.45umDL-氨酸Mouse LH(Luteinizing Hormone) ELISA Kit

Mouse LIFR(Leukemia Inhibitory Factor Receptor) ELISA Kit

順-2-烯-1,4-二醇 98%Biodyne尼龍轉(zhuǎn)印C膜負(fù)點6,6 0.45um4,4-二羥基二苯硫醚Mouse LIPC(Lipase, Hepatic) ELISA Kit

Mouse Lp-a(Lipoprotein a) ELISA Kit

水質(zhì)鋁標(biāo)樣 analytical standard,0.286mg/l,in water  u=0.031%MPbio弗氏*佐劑貝殼粉Mouse Lp-PL-A2(Lipoprotein-associated Phospholipase A2) ELISA Kit

Mouse Lptn(Lymphotactin) ELISA Kit

砷標(biāo)準(zhǔn)溶液 濃度范圍:0.444(mg/L) ±0.028mg/LMPbio弗氏不*佐劑貝殼粉Mouse LTF(Lactoferrin) ELISA Kit

Mouse LZM(Lysozyme) ELISA Kit

銻標(biāo)準(zhǔn)溶液 100mg/L,溶劑:1%鹽酸細(xì)胞刮,柄長18cm 刮片長1.8cm辣椒紅Mouse M2-PK(Pyruvate Kinase) ELISA Kit

Mouse MAPK(P38 Mitogen-activated Protein Kinase) ELISA Kit

銻標(biāo)準(zhǔn)溶液1.24±0.26mg/L大龍手動大容量移液器(助理移液器)鹿油Mouse MAPτ(Microtubule Associated Protein Tau/Tau Protein) ELISA Kit

Mouse MBP(Myelin Basic Protein) ELISA Kit

砷標(biāo)準(zhǔn)溶液 100mg/L,溶劑:微量鹽酸大龍TopPette移液器環(huán)酰胺Mouse MCP-2(Monocyte Chemotactic Protein 2) ELISA Kit

Mouse MCP-3(Monocyte Chemotactic Protein 3) ELISA Kit

醇中苯胺標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品大龍TopPette移液器苦茶粉Mouse MIP-1α(Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha) ELISA Kit

Mouse MIP-1β(Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta) ELISA Kit

水質(zhì)苯胺標(biāo)樣 濃度范圍:0.9,2.01(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品 大龍TopPette移液器氨基雜環(huán)鹽酸鹽Mouse MIP-3α(Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha) ELISA Kit

Mouse MIP-3β(Macrophage Inflammatory Protein 3β) ELISA Kit

烯腈標(biāo)準(zhǔn)溶液7.0mg/L,溶劑:二硫化碳大龍TopPette移液器人參根提取物Mouse MLCK/MYLK(Myosin light chain kinase) ELISA Kit

Mouse MMP-1(Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit
龍眼肉染料法PCR鑒定試劑盒規(guī)格營養(yǎng)瓊脂小斜面N-芐基甘氨酸酯 97%1%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基pUNO1-hAHR

無菌脫纖維綿羊血苯基二酸 98%SOC培養(yǎng)基pUNO1-hAIM2

血瓊脂平板DL-α-氨基苯酸 98%茜素-β-半乳糖苷肉湯(Aliz-gal肉湯)pUNO1-hAIREa

甘露醇發(fā)酵管對苯酸 99%溴酚紫蛋白胨培養(yǎng)液pUNO1-hAKR1C1

兔血漿硫代水楊酸 99%四號瓊脂pUNO1-hAKT1

葡萄糖肉湯2-氧基氧基基氯 95%營養(yǎng)瓊脂(瓊脂20g)pUNO1-hALG1

沙氏液體培養(yǎng)基含氯霉素正己烷 for HPLC, ≥98.0% (GC) 緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP試驗用培養(yǎng)基)pUNO1-hALG10

沙氏瓊脂培養(yǎng)基含氯霉素正庚烷 Standard for GC,>99.5%(GC)蛋白胨鹽溶液pUNO1-hALG12

營養(yǎng)瓊脂平板NA正庚烷 農(nóng)殘級, ≥99%(GC)頭孢菌素紙片(30ug/片)pUNO1-hALG13b

營養(yǎng)肉湯正庚烷 AR,98%萘啶酮酸紙片(30ug/片)pUNO1-hALG14 

 

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