服務流程：

公司產品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

反應五要素：

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

組成及試劑配制:

1、酶標板：一塊（96孔）

2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

PCR反應的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

猴激肽釋放酶7(KLK7) 羥醋酸瘦素受體抗體

猴腫瘤壞死因子β(TNF-β)羥磺酸銨鹽項韌帶彈性蛋白抗體

猴發(fā)動蛋白2(DNM2) 羥磺酸氧化低密度脂蛋白抗體

猴血管生成素(ANG)N-(2-羥)哌-N-(2-羥磺酸鈉)轉化生長因子β結合蛋白4抗體

猴血小板激活因子(PAF)HEPPSO;N-(2-羥)哌-N-(2-羥磺酸)G蛋白偶聯(lián)受體69B

猴p53上調凋亡調節(jié)因子(PUMA)HEPPS; N-(2-羥)哌-N-2-磺酸李斯特菌菌體蛋白抗體

猴Sp100核抗原(Sp100) N-(2-羥)哌-N-(2-磺酸鈉)Rho的鳥嘌呤核苷酸交換因子12抗體

猴熱休克蛋白90(HSP-90) HEPES；N-(2-羥)哌-N-(2-磺酸)白血病相關蛋白5抗體

猴嗜酸粒趨化因子受體(ECFR) 5,5-二硫雙(2-酸)富含亮氨酸重復蛋白62抗體

猴游離狀腺素(fT4) DIPSO.Na;3-[N-N-雙(2-羥)氨]-2-羥磺酸單鈉鹽淋巴磷蛋白磷酸酶相關蛋白抗體

猴B淋巴瘤因子10(Bcl-10)DIPSO; 3-[N-N-雙(2-羥)氨]-2-羥磺酸 含亮氨酸神經膠質瘤失活蛋白4抗體

猴核因子κB受體激活因子(RANκ)順式2,6-二嗎啉淋巴性白血病相關序列1抗體

猴腺苷酸環(huán)化酶4(ADCY4) 雙十八烷二溴化銨L-瓜氨酸抗體

猴免疫球蛋白G Fc段受體II(FcγR II/CD32) 2,3-二巰磺酸鈉半胱氨酸蛋白酶抗體

猴肽精氨酸脫亞氨酶IV(PADI4)CHPS-Na；3-氯-2-羥磺酸鈉乳酸脫氫酶D抗體

猴芳香烴受體(AhR)  CHES; 2-環(huán)己磺酸蛋白激酶LYK5抗體
牛巴氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒Caspase-9/FITC  熒光素標記白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG甘氨酸-L-亮氨酸 98%

Caspase-9/FITC  熒光素標記白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgGDL-谷氨酸 98%

Phospho-Caspase-9 (Pry153) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgGL-谷氨酸雙芐酯對磺酸鹽 98%

Caspase-10/FITC  熒光素標記半胱酸蛋白酶-10抗體IgGD-哌啶酸  99%

Caspase-12(hunman)/FITC  熒光素標記半胱酸蛋白酶蛋白-12抗體(人)IgGL-高精氨酸鹽酸鹽 98%

Caspase-12/FITC  熒光素標記半胱酸蛋白酶蛋白-12抗體IgGDL-高絲氨酸 99%

Caspase-13/FITC  熒光素標記半胱酸蛋白酶蛋白-13抗體IgGL-高絲氨酸 98%

Phospho-Caspase-9 (Thr125) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgGFmoc-L-羥脯氨酸 98%