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規(guī)格 | 50次 | 貨號 | YS-P013309 |
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品牌 | YSRIBIO |
參數規(guī)格:
產品名稱:鴨源性成分PCR檢測試劑盒
產品貨號:YS-P013309
產品規(guī)格:50次
產品分類:PCR檢測試劑盒
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.公司產品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
人孕激素誘導阻斷因子(PIBF)頭孢妥侖匹酯分裂周期2樣蛋白激酶5抗體
人尿苷二磷酸葡萄糖神經酰葡萄糖基轉移酶(UGCG)頭孢妥侖匹酯(標準品)CD20樣蛋白抗體(造血干4跨膜蛋白3)
人尿激酶型纖溶酶原激活因子(PLAU/uPA)吡酰周期蛋白依賴性激酶CABLES1抗體
人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)吡酰(標準品)分裂周期相關蛋白3抗體
人尿素酶相關蛋白C(UreC) 鹽酸地美環(huán)素;去甲基金霉素卷曲螺旋結構域蛋白148抗體
人內皮素受體B(ETRB)鹽酸地美環(huán)素;去甲基金霉素(標準品)卷曲螺旋結構域蛋白153抗體
人凝溶膠蛋白(GS) 甲基帕羅汀卷曲螺旋結構域蛋白160抗體
人凝血酶(TM)硫酸頭孢喹諾卷曲螺旋結構域蛋白22抗體
人凝血酶/抗凝血酶復合物(TAT)頭孢噻呋鈉卷曲螺旋結構域蛋白25抗體
人凝血酶敏感蛋白1(TSP1)頭孢噻呋鈉(標準品)卷曲螺旋結構域蛋白28A抗體
人凝血酶受體(TR)硫酸鈉卷曲螺旋結構域蛋白28B抗體
人凝血酶原(PT) 5'-三磷酸胞苷二鈉鹽(二水)腫瘤/抗原74抗體
人凝血酶原片段F1+2(F1+2)伏格列波糖卷曲螺旋結構域蛋白38抗體
人角膜蛋白(KERA)伏格列波糖(標準品)7號染色體開放閱讀框72抗體
人紐蛋白(VCL)克里唑啼尼;克里唑替尼,Crizotinib卷曲螺旋結構域蛋白42抗體
人防御素α5(DEFα5)BMS 582664卷曲螺旋結構域蛋白47抗體
鴨源性成分PCR檢測試劑盒C Peptide C-肽抗體氯鈀酸銨 Pd ≥29.5%
CPT1A 肉堿棕櫚?;D移酶1A抗體氯亞鈀酸銨 Pd ≥36.5%
CPSF4/CPSF30 剪切和多聚腺苷酸化特異性因子4抗體氯銠酸銨 Rh 27.5%
Calretinin 鈣結合蛋白抗體二(基苯)二氯化鈀 Pd 27.7%
Crk p38 /CrkII Crk p38抗體二亞硝基二氨鉑 59.0%
phospho-Crk p38 (Tyr221) 磷酸化Crk p38抗體氯銥酸 Ir 35% in HCl
SLAMF6 SLAMF6抗體氯亞鉑酸 AR
CRMP2 CRMP2抗體氧化鈀 Pd ≥85%
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
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