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黃熱病毒(YFV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)

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產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-11-21 19:36:08瀏覽次數(shù):132次

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規(guī)格 50T 貨號 YS-P014481
品牌 YSRIBIO
黃熱病毒(YFV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

QQ截圖20191211135002.jpg
服務(wù)流程:

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

黃熱病毒(YFV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)

50T

YS-P014481

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

同型半胱氨酸(Hcy)檢測試劑盒英文名稱:Hcy ELISA Kit磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體包裝1g

鐵調(diào)素(Hepc)檢測試劑盒英文名稱:Hepc ELISA Kit雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸源性生長因子)抗體包裝250mg

鐵蛋白(Ferritin)檢測試劑盒英文名稱:Ferritin ELISA Kit磷酸化通道蛋白2抗體包裝100g

鐵蛋白(FE)檢測試劑盒英文名稱:FE ELISA Kit粘附相關(guān)激酶抗體包裝25g

天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)檢測試劑盒英文名稱:AST ELISA Kit磷酸化粘附相關(guān)激酶抗體包裝5g

天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)檢測試劑盒英文名稱:AST ELISA Kit磷酸化蛋白激酶B抗體包裝1g

糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)檢測試劑盒英文名稱:GP-MM ELISA Kit磷酸化通道蛋白2抗體包裝5g

糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)檢測試劑盒英文名稱:GP-II ELISA Kit磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝1g

糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)檢測試劑盒英文名稱:GP-BB ELISA Kit磷酸化蛋白激酶B抗體包裝1g

糖原合成酶激酶(GSK)檢測試劑盒英文名稱:GSK ELISA Kit磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝5g

糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)檢測試劑盒英文名稱:CDT ELISA Kit磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體包裝1g

糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)檢測試劑盒英文名稱:GR ELISA Kit磷酸化雄受體抗體包裝5g

糖皮質(zhì)受體β(GR-β)檢測試劑盒英文名稱:GR-β ELISA Kit磷酸化雄受體抗體包裝5mg

糖皮質(zhì)受體α(GR-α)檢測試劑盒英文名稱:GR-α ELISA Kit磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體包裝1g

糖類抗原199(CA199)檢測試劑盒英文名稱:CA199 ELISA Kit磷酸化蛋白激酶B抗體包裝1g
黃熱病毒(YFV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)STK(Reat serine/threonine protein kinase,STK) ELISA Kit  大鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶1-萘 95%

RBC(Rat red cell antibody )ELISA Kit  大鼠抗紅抗體2-烯萘 97%

CD3(Rat Cluster of differentiation 3,CD3) ELISA Kit  大鼠CD3分子4-叔丁 97%

JNK (Rat c-Jun N-terminal kinases,JNK) ELISA Kit  大鼠c-Jun氨末端激酶鹽酸金霉素 USP級,≥80.0% (HPLC)

MHB(Rat Methemoglobin,MHB) ELISA Kit  大鼠高鐵血紅蛋白硫酸慶大霉素 USP級

DAO(Rat diamine oxidase,DAO) ELISA Kit  大鼠二氧化酶硫酸慶大霉素 potency: ≥590 μg Gentamicin per mg

MT/MLT (Rat Melatonin,MT/MLT) ELISA Kit  大鼠褪黑素硫酸慶大霉素 分析標(biāo)準(zhǔn)品

FGF-10(Rat fibroblast growth factor-10,FGF-10 )ELISA Kit  大鼠成纖維生長因子10酰 99%

 


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