服務(wù)流程：

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

組成及試劑配制:

1、酶標板：一塊（96孔）

2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

猴肽酰脯氨酰異構(gòu)酶/親環(huán)素樣蛋白1(PPIL1)DMT保護性脫氧肌苷LRRC59蛋白抗體

猴α1連接素(CTNNα1)N-酰-5'-O-(4,4'-二氧三)-2'-脫氧胞苷LRRC41蛋白抗體

猴血紅蛋白C(HbC)  保護胸甙(DMT-T)促黃體生成素受體抗體

猴白分化抗原CD99(CD99) DMT保護性脫氧尿苷乳清蛋白α抗體

猴早期生長應(yīng)答蛋白4(EGR4)D-木糖(標準品)核纖層蛋白B2抗體

猴末端補體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9) D-木糖層粘蛋白α5抗體

猴泛素蛋白(Ub) 2',3'-二脫氧尿苷(ddU)L-瓜氨酸抗體

猴谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶θ1(GSTθ1/GSTt1)潮霉素B泌乳升高蛋白1抗體

猴糖原合成酶激酶3α(GSK3α)5'-O-(4,4'-二氧三)-N2-異丁酰-2'-脫氧鳥苷(DMT-ibu- dG)溶酶體相關(guān)膜蛋白4α抗體

猴血小板衍生生長因子亞B(PDGFB)N4-酰-5'-O-(4,4'-二氧三)-2'-脫氧胞甘(DMT- Bz- dC）分化相關(guān)因14抗體

猴胃泌素抑制肽(GIP)  N6-酰-5'-O-(4,4'-二氧三)-2'-脫氧腺苷(DMT-dA-Bz)β內(nèi)酰酶樣蛋白2抗體

猴富含半胱氨酸型酸性蛋白(SPARC)rU亞磷酰單體神經(jīng)突觸粘附樣分子4抗體

猴前列腺素I合酶(PTGIS)Bz-rA亞磷酰單體可溶性半乳糖凝集素3結(jié)合蛋白抗體

猴多巴β羥化酶(DβH)  i-bu-rG亞磷酰單體瘦素抗體

猴正輔因子4(PC4)PF299804（EGFR抑制劑）磷脂酸磷酸酯酶LPIN1抗體

猴角蛋白18(CK-18/KRT18)  Ac-rC亞磷酰單體G蛋白偶聯(lián)受體6抗體
人類內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒W家族RT-PCR試劑盒CCL4/MIP-1 Beta/FITC  熒光素標記巨噬炎性蛋白1β抗體IgGL-脯氨 97%

CCL5/RANTES/FITC  熒光素標記調(diào)節(jié)活化的正常T表達和分泌的因子IgGD-甘氨酸酯鹽酸鹽 96%

CCL6/C10/FITC  熒光素標記嗜酸粒趨化蛋白CCL6抗體IgGL-甘氨酸酯鹽酸鹽 98%

CCL9/CCL10/MIP-1 Gamma/FITC  熒光素標記巨噬炎癥蛋白-1γ抗體IgGL-高脯氨酸 98%

CCL11/FITC  熒光素標記嗜酸粒趨化蛋白抗體IgGL-氨酸酯鹽酸鹽 98%

CCL12/MCP-5/FITC  熒光素標記單核趨化蛋白5抗體IgGL-氨酸酯鹽酸鹽 98%

CCL13/MCP-4/FITC  熒光素標記單核趨化蛋白4抗體IgGD-脯氨酸 99%

CCL14/HCC-1/FITC  熒光素標記嗜酸粒趨化蛋白14抗體IgGN-甘氨酸 97%
反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。