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規(guī)格 | 50次 | 貨號 | YS-P013571 |
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品牌 | YSRIBIO |
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱:JC病毒染料法熒光定量PCR試劑盒
產品貨號:YS-P013571
產品規(guī)格:50次
產品分類:PCR檢測試劑盒
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.公司產品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數(shù)據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
豬自噬因(BECN1) 芐索氯銨γ谷氨酰轉肽酶2輕鏈抗體
豬C4結合蛋白(C4BP) β-淀粉樣蛋白(1-42),大鼠γ-谷氨酰轉肽酶5輕鏈抗體
豬蛋白脂質蛋白抗體(PLP)血管緊張素Iγ-谷氨酰轉肽酶7輕鏈抗體
豬α-胞襯蛋白(SPTAN1) 血管緊張素III溶酶體累積病相關蛋白/口吃相關蛋白抗體
豬鳥苷酸環(huán)化酶激活因子2A(GUCA2A) 蜂明肽; 蜂針液明肽糖原合酶激酶3α+β抗體
豬角蛋白13(CK-13/KRT13) 枸櫞酸氯米芬,克羅米芬G2期/S期應答相關蛋白1抗體
豬叉頭框蛋白O4(FOXO4)ML-176;SR-3335生長分化因子8/肌肉抑制素抗體
豬間隙連接蛋白43(CX43) Semaxanib(SU-5416 )磷酸化糖原合酶激酶3α/β抗體
豬補體成分3(C3) 米爾貝肟SEC63域內含蛋白1抗體
豬表皮生長因子受體2(EGFR2)2-巰吡啶-N-氧化物 鋅鹽;吡啶硫酮鋅,吡硫鋅A型病H7N9 M1蛋白抗體
豬血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)伐地考昔人類狀瘤病33 E6蛋白抗體
豬唾液酸結合免疫球蛋白樣凝集素8(SIGLEC8)胃膜素,胃粘蛋白,人胃泌素Beta氨己糖苷酶beta亞蛋白A鏈抗體
豬成纖維生長因子21(FGF21)UDPGA Na;尿苷-5'-二磷酸葡糖酸三鈉鹽磷酸化熱休克蛋白-70抗體
豬血小板相關抗體IgM(PA-IgM) 替卡西林,替卡西林二鈉磷酸化熱休克蛋白-70抗體
豬轉鐵蛋白(TRF)替卡西林(標準品)19號染色體開放閱讀框38抗體
豬趨化因子C-X3-C-元配體(CX3CL1)RGD肽酰肝素酶抗體
JC病毒染料法熒光定量PCR試劑盒TETRODOTOXIN ( TTX ) 抗體4-氧-4'-二 98%
TP-1/TEP1 端粒酶相關蛋白1抗體4-氧二 98%
Tetraspan5 四分子交聯(lián)體5抗體烯酸酐 94%
TFF2 三葉肽因子2抗體4-硝三 98%
TFF3 三葉肽因子3抗體三(4-) 97%
TIF1 Alpha/TRIM24 轉錄中介因子Tif1α抗體三(4-) 98%
TIF1 beta/KAP1 轉錄中介因子Tif1β抗體三(4-酰) 97%
Phospho-TIF1beta (Ser824) 磷酸化轉錄中介因子Tif1β抗體N,N,N,N-四聯(lián) 98%
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
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