組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）

2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
服務流程：

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務。

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

PCR反應的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

反應五要素：

參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

綿羊性別決定區(qū)Y框蛋白18(SOX18) 3-磷酸甘油脫氫酶

綿羊低分子肝素(LMWH) 谷氨酸脫羧酶-65(抗原)

綿羊熱休克蛋白60(HSP-60/HSPD1) 糖原合酶激酶-3β（多肽）

綿羊肝配蛋白A4 (EFNA4)核突觸蛋白-γ抗原

綿羊核因子κB抑制蛋白β(IκBβ)胰高血糖素樣肽-1受體多肽

綿羊肌腱蛋白X(TNX)慶大霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白

綿羊前膠原C端肽酶(PCP) 重組谷胱甘肽-轉(zhuǎn)移酶

綿羊抗存活素抗體(Anti-Surv) 慶大霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白

綿羊蛋白C(PROC)人血清白蛋白

綿羊蛋白激酶C-δ1(PKCδ1)人beta 亞人絨毛膜促性腺激素抗原

綿羊端粒酶(TE)高遷移率族蛋白-1(抗原)

綿羊β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)水蛭素

綿羊Bcl2樣蛋白11(Bcl2L11)人類狀瘤病16抗原

綿羊脫氫表雄酮S7(DHEA-S7) 鐵調(diào)節(jié)蛋白25

綿羊10kDa干擾素γ誘導蛋白(IP-10/CXCL10)4羥壬烯酸偶聯(lián)牛血清白蛋白

綿羊癌抗雌激素藥物耐藥性因1(BCAR1) 干擾素-γ多肽抗原（人）
雞種特異性基因檢測試劑盒（熒光PCR法）CLCA4(Calcium-activated chloride channel 4)  鈣激活氯離子通道4抗原檸檬酸,一水 Standard for GC

C-Mer/MERTK (proto-oncogene tyrosine kinase)  c-mer原癌因酪氨酸激酶抗原檸檬酸,一水  AR,99.5%

c-Myc tag   c-Myc tag標簽多肽檸檬酸,一水 99.995% metals basis

AU5 tag  AU5 tag標簽抗原檸檬酸,一水 GR,99.8%

AU1 tag peptide  AU1 tag標簽多肽檸檬酸,一水 ACS, 99.0-102.0%

Glu-Glu Tag peptide  Glu-Glu Tag多肽蛋白檸檬酸,一水 Ph. Eur., BP, USP, E330, 99.5-100.5%

CNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2)  環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2抗原檸檬酸 一水  ≥99.9998% metals basis

CNP/CNPase ( 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase)  C型鈉尿肽抗原檸檬酸 AR,99.5%