參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：乳酸桿菌(LB)檢測試劑盒(熒光-PCR法)

產(chǎn)品貨號：YS-P014416

產(chǎn)品規(guī)格：50T

產(chǎn)品分類：PCR檢測試劑盒

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

特點優(yōu)勢：

1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。

2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐

的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
實驗過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．公司產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

一、樣品采集：

1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。

2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。

3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。

4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。

一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）

1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。

2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。

4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用

6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

鹽酸帕他莫英文名稱： Potassium hydrogen tartrate磷酯酶Cβ2抗體包裝1g

鹽酸哌維林英文名稱： Potassium O-ethyl xanthate硫氧還蛋白過氧化物酶Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體包裝250mg

鹽酸布因英文名稱： Potassium oleate磷脂酰肌激酶（PI3Kβ）抗體包裝5g

鹽酸汀(混旋)英文名稱： Potassium phosphate, dibasic, trihydrate磷脂酸磷酸酶2結(jié)構(gòu)域3抗體包裝100g

鹽酸西汀(右旋)英文名稱： Potassium phosphate, tribasic trihydrate胞質(zhì)分裂調(diào)控蛋白1抗體包裝500g

鹽酸氮卓斯汀英文名稱： Potassium silicate hydrate磷酸化蛋白磷酸酶2A（PP2Aα）抗體包裝5mg

鹽酸地芬尼多英文名稱： Potassium stearate石骨癥相關(guān)蛋白PLEKHM1抗體包裝1g

鹽酸丁卡因英文名稱： Potassium tartrate, hydrate血小板白C激酶底物同源結(jié)構(gòu)域M2抗體包裝25g

鹽酸度洛西汀英文名稱： Potassium lurite血小板白C激酶底物同源結(jié)構(gòu)域M3抗體包裝5g

鹽平英文名稱： Potassium tetraoxalate dehydrate多腺苷二磷酸多聚酶抗體(N端)包裝1g

鹽酸多沙普侖英文名稱： Potassium thiosulfate酪氨酸磷酸酶PTPδ抗體 蛋白酪氨酸磷酸酶D受體抗體包裝5g

鹽酸伐昔洛韋/鹽酸萬乃洛韋英文名稱： Potassium titanyl oxalate ,dehydrate鈣粘蛋白相關(guān)神經(jīng)受體8抗體包裝1g

鹽酸非那吡啶;3-苯基偶氮-2,6-二氨基吡啶鹽酸鹽英文名稱： p-Phthaldehyde原鈣粘附蛋白18抗體包裝5g

鹽酸非索非那定英文名稱： Propyl red原鈣粘附蛋白20抗體包裝1g

鹽酸芬戈莫德英文名稱： Pyrazole原鈣粘附蛋白8抗體包裝25g
乳酸桿菌(LB)檢測試劑盒(熒光-PCR法)sVE-Cadherin (Human Vascular Endothelial-Cadherin Complex) ELISA Kit  人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體正丁酸 AR,99%

Alpha-SMA(Human Alpha-Smooth muscle actin) ELISA Kit  人α平滑肌肌動蛋白正丁酸 CP,98%

Alpha-SCA(Human Alpha-sarcomeric actin) ELISA Kit  人α橫紋肌肌動蛋白正丁酸 99.5%

SMM(Human smooth muscle Myosin) ELISA Kit  人平滑肌肌球蛋白鄰酚 99%

c(Human cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit  人心肌特異性肌鈣蛋白T異丁 98%

MHC(Human myosin heavy chain) ELISA Kit  人肌球蛋白重鏈2-硝烷 96%

HSP-27(Human heat shock protein 27) ELISA Kit  人熱休克蛋白271-硝烷 99%

ANG(Human angiostatin) ELISA Kit  人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白硝烷 99%