參數規(guī)格：
產品名稱：無乳鏈球菌染料法熒光定量PCR試劑盒
產品貨號：YS-P013407

產品規(guī)格：50次

產品分類：PCR檢測試劑盒

產品運輸：低溫運輸

產品保存：-20℃保存

產品有效期：一年

產品特點：本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．公司產品僅用于科研對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢：

1.   特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。

2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。

3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。

小鼠鈣結合蛋白S100A11(S100A11) 甲霜靈（標準品）4號染色體開放閱讀框51抗體

小鼠鈣結合蛋白S100A7(S100A7) 磷標準溶液（100μg/ml,u=4%）分支酶GBE1抗體

小鼠S100鈣結合蛋白B (S100B) 磷標準溶液（1.00mg/ml,基體：甲）磷酸化絲切蛋白抗體

小鼠鈣結合蛋白S100A6(S100A6) 甲氧滴滴涕（標準品）補體成分5受體1抗體

小鼠S100鈣結合蛋白A12(S100A12 )甲氧?。藴势罚┓至阎芷?樣蛋白激酶6抗體

小鼠山梨脫氫酶(SDH)滅草?。藴势罚┭a體C3IP1抗體

小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)滅多威（標準品）磷酸化周期檢測點激酶2抗體

小鼠促胰液素(SCT)煙嘧磺?。藴势罚┲芷谒匾蕾囆约っ?1抗體

小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)戊硫（標準品）周期素依賴性激酶10

小鼠硒蛋白P(SEPP1)甲酸銨（色譜級）8號染色體開放閱讀框86抗體

小鼠腦信號素7A(SEMA7A)Amberlite IR-120陽離子交換樹脂（鈉型）磷酸化分裂周期蛋白25B抗體

小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK) 乙酸戊酯（標準品）磷酸化分裂周期蛋白25B抗體

小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)烯酸（HPAA）（標準品）磷酸化半胱酸蛋白酶蛋白6抗體

小鼠Sestrin 1蛋白 (SESN1) 苯乙酮（標準品）9號染色體開放閱讀框172抗體

小鼠Sestrin 2蛋白 (SESN2) 苯甲（標準品）磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑

小鼠Sestrin 3蛋白 (SESN3) 氯烯（標準品）表面趨化因子受體4相關蛋白2抗體
無乳鏈球菌染料法熒光定量PCR試劑盒phospho-IKK beta (Tyr466)  磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體桑色素 分析標準品，≥98

phospho-IKK beta (Tyr199)  磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體2-甲基-3-三氟 99%

phospho-IKK gamma (Ser85)  磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體三酚  ≥99.0% (HPLC)

phospho-IKK gamma (Ser31)  磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體三酚標準溶液 1000μg/ml，溶劑：甲

phospho-IKK gamma (Ser376)  磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體酚 植物培養(yǎng)級，>99.0% (HPLC)

IKI3 family protein  擬南芥IKI3抗體,二水 99%

IL-9  白介素9抗體苯酸 97%

IL-10  白介素-10抗體羅丹明6G Biological stain
使用方法：

一、樣品采集：

1、食品樣品：樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。

2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。

3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。

4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。

一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）

1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。

2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。

4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用

6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。