培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

 產(chǎn)品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩(wěn)定。在技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度?？萍继峁┑募毎袠藴实蔫b定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、科技售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

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細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.

察氏培養(yǎng)基苯醇 AR,99%無菌鹽水管（50ml）pUNO1-hIFNA2b

產(chǎn)毒培養(yǎng)基苯醛 ACS醛類中和劑管（50ml）pUNO1-hIFNA21

磷酸鹽緩沖液（pH7.2）化芐  >99.0%(GC)醛類中和劑管（帶棉簽）pUNO1-hIFNA2a

無菌磷酸鹽緩沖液（pH7.2）二芐醚 97%軍團菌菌種保存管pUNO1-hIFNA4

無菌磷酸鹽緩沖液（pH7.2）二芐醚 ≥98%, FCC雙抗巧克力瓊脂添加劑pUNO1-hIFNA5

培養(yǎng)基α,α,α-三苯 99%TSA-YE平板pUNO1-hIFNA6

平板計數(shù)瓊脂（PCA）聚氧烯20油醚 average Mn ~1,150含青酶TSA平板9cmpUNO1-hIFNA7

卵磷脂-吐溫 80 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基基礎司班20 CP酸性羅氏培養(yǎng)基管（7ml）pUNO1-hIFNA8

蛋白胨溶液山油酸山梨醇酯 CP志賀氏增菌肉湯（顆粒）pUNO1-hIFNAR1

無菌白胨溶液油酸山梨醇酯（司班80） CP木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽培養(yǎng)基平板（USP）pUNO1-hIFNAR2a

大鼠腎上皮細胞價格肌醇 99%苯唑西林藥敏實驗紙片（擴散法） OX 1ug通用氨氮去除劑Rat /nNOS(Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal) ELISA Kit

Rat PDGFB(Plaet-derived growth factor subunit B) ELISA Kit

位己內(nèi)酯  99%阿莫西林 AmL 10ug木質素鈣Rat IL-7(Interleukin-7) ELISA Kit

Rat FGF23(Fibroblast growth factor 23) ELISA Kit

位癸內(nèi)酯 98%頭孢噻肟藥敏實驗紙片（擴散法） CTX 30ug氧化鋅Rat NOS3/eNOS(Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial) ELISA Kit

Rat NOS2/iNOS(Nitric Oxide Synthase 2, Inducible) ELISA Kit

位癸內(nèi)酯 ≥98%, FCC FOS 50ug鐵皮石斛提取物Rat INHbA(Inhibin beta A) ELISA Kit

Rat Npy(Pro-neuropeptide Y) ELISA Kit

位癸內(nèi)酯 分析標準品,≥98% (GC)哌拉西林藥敏實驗紙片（擴散法） PRL 100ug四尿酸Rat Gip(Gastric inhibitory polypeptide) ELISA Kit

Rat A2m(Alpha-2-macroglobulin) ELISA Kit

位癸內(nèi)酯 98%利福平 RD 5ug1-溴-2-炔Rat Wisp1(WNT1-inducible-signaling pathway protein 1) ELISA Kit

Rat IL-21(Interleukin-21) ELISA Kit

位癸內(nèi)酯 ≥98%, FCC, FG阿莫西林-棒酸（澳格門） AMC 30ug乳化劑MOA-3BRat Sost(Sclerostin) ELISA Kit

Rat Stat3(Signal transducer and activator of transcription 3) ELISA Kit

位十二內(nèi)酯  98%頭孢哌酮藥敏實驗紙片（擴散法） CFP 75ug工業(yè)葡萄糖Rat Il24(Interleukin-24) ELISA Kit

Rat Fabp1(Fatty acid-binding protein, liver) ELISA Kit

位十二內(nèi)酯  分析標準品,≥98.5% (GC)氨曲南藥敏實驗紙片（擴散法） ATM 30ug聚合鋁鐵Rat Tnni2(Troponin I, fast skeletal muscle) ELISA Kit

Rat Tnni1(Troponin I, slow skeletal muscle) ELISA Kit

位十二內(nèi)酯  98%, FCC, Kosher頭孢他啶藥敏實驗紙片（擴散法） CAZ 30ug二硫化鉬Rat Epo(Erythropoietin) ELISA Kit

Rat FGF7(Fibroblast Growth Factor 7) ELISA Kit