服務(wù)流程：

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對(duì)原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

猴間隙連接蛋白31(CX31) TES；Tris磺酸,2-[（三（羥））氨]-1-磺酸MD-1蛋白抗體

猴色素P450家族成員7A1(CYP7A1) 3-[ (N-三(羥)氨]-2-羥磺酸鈉MD-2蛋白抗體

猴蛋白17(Sp17)TAPSO；3-[ (N-三(羥)氨]-2-羥磺酸淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗體

猴半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)  N-三(羥)-3-氨磺酸鈉肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體

猴胱天蛋白酶12(Casp12) 1,1-環(huán)二羧酸熒光素酶抗體

猴GATA結(jié)合蛋白3(GATA3)TAPS；N-三(羥)-3-氨磺酸亮氨酸氨肽酶3抗體

猴血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3) 2--2-烯酸-2-磺酯肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體

猴補(bǔ)體成分2(C2)  哌-N,N-雙(2-羥烷磺酸)倍半鈉鹽腫瘤抑制因LPP2抗體

猴肌球蛋白重鏈9(MYH9) 哌-N,N-雙(2-羥烷磺酸)二鈉腫瘤抑制因LATS1抗體

猴末端運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白1(SMN1)PI3K 抑制劑磷酸化單絲氨酸蛋白激酶1/2抗體

猴性別決定區(qū)Y框蛋白2(SOX2)POPSO;哌-N,N-雙(2-羥烷磺酸)磷酸化腫瘤抑制因LATS1抗體

猴趨化素樣因子超家族成員4(CKLFSF4)吩硫酸酯磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體

猴轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)1,4-哌二磺酸倍半鈉鹽磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體

猴蛋白激酶B(PKB)PIPES鈉鹽;1,4-哌二磺酸單鈉鹽磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體

猴色素上皮衍生因子(PEDF)1,4-哌二磺酸二鈉鹽黃體激素釋放激素類似物抗體

猴肌肉糖原磷酸化酶(PYGM)1,4-哌二磺酸二鹽磷酸化核纖層蛋白A/C抗體
脲原體通用染料法熒光定量PCR試劑盒ISR- Alpha/RBITC  紅色熒光素羅丹明標(biāo)記(RBITC)胰島素受體-α抗體IgG(標(biāo)記抗體)Fmoc-L-色氨酸 98%

CAP2/FITC  熒光素標(biāo)記環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗體IgGFmoc-L-氨酸 98%

Cap43/NDRG1 /FITC  熒光素標(biāo)記分化相關(guān)因Cap43抗體IgGFmoc-D-氨酸 98%

/FITC  熒光素標(biāo)記凋亡敏感性因抗體IgGFmoc-D-色氨酸 98%

Casein/FITC  熒光素標(biāo)記抗牛酪蛋白抗體IgGFmoc-天門冬氨酸-β-芐酯 99%

Caspase-1/FITC  熒光素標(biāo)記天冬氨酸-胱氨酸特異性蛋白酶家族抗體IgGFmoc-L-脯氨酸 98%

Caspase-3/RBITC  紅色熒光素羅丹明標(biāo)記(RBITC)Caspase-3 蛋白抗體(標(biāo)記抗體)Fmoc-L-蘇氨酸 BR

Caspase-3 p17 subunit/FITC  熒光素標(biāo)記Caspase-3 p17 subunit蛋白抗體Fmoc-L-天冬酰 BR