試劑配制
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

服務(wù)：
      我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測(cè)試劑盒，有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。

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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

桔梗皂苷D 58479-68-8 訂購(gòu)|咨詢(xún)  規(guī)格： 20mg

黃柏堿 6873-13-8 訂購(gòu)|咨詢(xún)  規(guī)格： 20mg

高三尖杉酯堿 26833-87-4 訂購(gòu)|咨詢(xún)  規(guī)格： 20mg

1,7-二羥基-3,4-二甲氧基山-7  訂購(gòu)|咨詢(xún)  規(guī)格： 10mg

麥冬皂苷A 11054-24-3 訂購(gòu)|咨詢(xún)  規(guī)格： 10mg

地榆皂苷Ⅰ 35286-58-9 訂購(gòu)|咨詢(xún)  規(guī)格： 20mg

刺囊酸 510-30-5 訂購(gòu)|咨詢(xún)  規(guī)格： 20mg

羊藿次苷I（95%）  訂購(gòu)|咨詢(xún)  規(guī)格： 20mg

10－脫乙酰基巴卡丁III 32981-86-5 訂購(gòu)|咨詢(xún)  規(guī)格： 20mg

7-羥基-4-香 90-33-5 訂購(gòu)|咨詢(xún)  規(guī)格： 20mg

新堿 2752-64-9 訂購(gòu)|咨詢(xún)  規(guī)格： 20mg

阿魏酸 1135-24-6 訂購(gòu)|咨詢(xún)  規(guī)格： 20mg

新橙皮苷 13241-33-3 訂購(gòu)|咨詢(xún)  規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/vial

地奧斯明 520-27-4 訂購(gòu)|咨詢(xún)  規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial

槲皮素-7-O-BETA-D-吡喃葡萄糖 491-50-9 訂購(gòu)|咨詢(xún)  規(guī)格： HPLC≥98%,10mg/vial

大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125 ELISA檢測(cè)試劑盒A3(人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

糖化酵母 Saccharomyces diastaticus

苜蓿中華根瘤菌

RM-1(小鼠前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

紅冬孢酵母 Rhodosporidium toruloides

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

HSC-T6, 大鼠肝星狀細(xì)胞系 Rattus

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

地衣芽胞桿菌 Bacillus licheniformis

小鼠角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

唾液桿菌水楊素亞種 Lactobacillus salivarius subsp. salicinius

發(fā)根根瘤菌 Rhizobium rhizogenes

BHK-21(倉(cāng)鼠腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

凍膠假絲酵母 Candida gelida

根瘤菌 Rhizobium sp.

操作步驟：
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。