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服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠維生素B6(VB6)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rat vitamin B6 (VB6) ELISA Kit |
貨號 | YS-R12323 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
劍葉龍血素C 956103-79-0 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
核糖 訂購|咨詢 規(guī)格: 200mg
無熱原吸頭 訂購|咨詢 規(guī)格: 200ul,96個/盒
二醇物 訂購|咨詢 規(guī)格: 50mg
蒼術(shù)(茅蒼術(shù)) 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.5g
丹酚酸D;丹參酚酸D 142998-47-8 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
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格列風(fēng)內(nèi)酯 61371-55-9 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
草烏甲素 107668-79-1 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
秦皮乙素 305-01-1 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
酸軟骨素 9007-28-7 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
絡(luò)塞琳 84954-93-8 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
6-姜烯酚; 姜烯酚 555-66-8 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
楊梅素;楊梅黃;楊梅 529-44-2 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
人參皂苷Rh3 105558-26-7 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
大鼠維生素B6(VB6)ELISA檢測試劑盒肌醇測定培養(yǎng)基/Inositol Assay Broth嬰幼兒配方食品和粉中肌醇測定250克國產(chǎn)/進(jìn)口
Orchimax培養(yǎng)基/Orchimax MediumBR10升國產(chǎn)/進(jìn)口
人肺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠牙細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
L-酪氨酸營養(yǎng)瓊脂配套試劑 規(guī)格: 10支/盒 用途: L-酪氨酸營養(yǎng)瓊脂基礎(chǔ)配套試劑
三糖鐵瓊脂(TSI) 規(guī)格: 250g 用途: 用于鑒別腸道菌發(fā)酵蔗糖、糖、葡萄糖及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)
胞外超氧化物歧化酶(SOD3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3)
環(huán)氧化合物水解酶4(EPHX4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Epoxide Hydrolase 4 (EPHX4)
娠關(guān)聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)重組蛋白英文名稱:Recombinant Pregnancy Associated Plasma Protein A (PAPPA)
胰島素樣生長因子1(IGF1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1)
HEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Ishikawa(人子宮內(nèi)膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SW 1990(人胰腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人小細(xì)胞肺英文名稱:NCI-H524
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化)英文名稱:PC-12(高分化)
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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