服務(wù)流程：

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對(duì)原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡(jiǎn)便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。

(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

小鼠循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)氫氧化鋁(>98%,BR)軟骨糖蛋白39抗體

小鼠胱天蛋白酶8(P8) 磷酸銨三水(>98%,BR)癌胚抗原抗體

小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)蛋白碳酸鋇(>99%,BR)癌胚抗原相關(guān)粘附分子8抗體

小鼠β淀粉樣蛋白40(Aβ40)苯甲酰(>98%,BR)C型鈉尿肽抗體

小鼠β淀粉樣蛋白42(Aβ42)比布里希猩紅(>90%,BS)組織蛋白酶K抗體

小鼠類(lèi)胰蛋白酶(TPS)檸檬酸鈣；檸檬酸鈣四水組織蛋白酶D抗體

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)硫酸銫(分子生物學(xué)級(jí))組織蛋白酶H抗體

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP-12)銅片磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)氯化亞銅(>97%,BR)磷酸化半胱氨酸蛋白酶9抗體

小鼠可溶性間粘附分子1(sICAM-1/CD54)化亞銅(>99%,BR)磷酸化半胱氨酸蛋白酶9抗體

小鼠血管生成素(ANG)2'-脫氧鳥(niǎo)苷5'二磷酸二鈉鹽磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體

小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH) D-葡萄糖酸鈉(> 98%，BR)磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體

小鼠骨保護(hù)素(OPG)乙二四乙酸二鈉一鈣鹽磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體

小鼠游離雌三(F-E3)聚蔗糖70磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體

小鼠催乳素(PRL)碳酸胍(>98%,BR)造血干抗原CD133抗體

小鼠肌紅蛋白(MYO)六次甲基四(>99%，BC)1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框138抗體
棉花黃萎病菌PCR試劑盒FLG(filaggrin)  絲聚蛋白/中間絲蛋白抗體百里香酚藍(lán) IND

FLIP S/L   凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體百里香酚藍(lán) ACS reagent, 95 %

FLIPS  凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體（短型）百里香酚酞 indicator

FLT-3/CD135  FMS樣酪氨酸激酶3香草 AR，99%

Phospho-FLT3 (Tyr591)  磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3瑞氏色素 BS

Phospho-FLT3 (Tyr589/591)  磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3瑞氏色素 高純級(jí),>97%（HPLC),用于血液和生物學(xué)染色

Phospho-FLT3 (Tyr842)  磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3二甲酚橙 AR

Phospho-FLT3 (Tyr969)  磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3二甲酚橙 高純級(jí)
反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。