服務流程：

公司產品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

組成及試劑配制:

1、酶標板：一塊（96孔）

2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

PCR反應的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

雞蕈堿型酰膽堿受體(M-AChR) 一氧化氮合成酶-2（抗原）

雞血管舒緩激肽(BK)  蛇巴曲酶抗原

雞彈性蛋白酶4(ELA4)  一氧化氮合成酶-3（抗原）

雞嗜酸性白血球相關之RNA水解酵素家族成員2(EAR2) 神經肽 Y（抗原）

雞G補綴FHA域血管生成因子1(AGGF1)谷氨酸受體（抗原）

雞氨端前腦鈉素(NT-proBNP)神經生長因子-3（抗原）

雞血小板膜糖蛋白VI(GP6) 神經生長因子4/5（抗原）

雞蛋白激酶Cα相互作用蛋白α1(PICK1)神經生長因子（抗原）

雞血小板親和蛋白2(PKP2)Bcl-xL蛋白抗原

雞緊密連接蛋白Claudin 4(CLDN4) 磷酸化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原

雞N端中段骨鈣素(N-MID-OT)丁酰膽堿脂酶抗原(N端)

雞單氧化酶(MAO)丁酰膽堿脂酶抗原(C端)

雞血小板膜糖蛋白II b/III a(GPIIb/IIIa)核受體相關因子-1（抗原）

雞凋亡信號調節(jié)激酶I(ASK-1) 胞漿-5′-核苷酸酶-Ⅱ

雞OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)  一種抑癌因（多肽）

雞GATA結合蛋白2(GATA2)成骨生長肽 (骨生長激素肽)(蛋白多肽)
豬流行性腹瀉病毒檢測試劑盒（熒光PCR法）BSA  兔抗牛血清白蛋白抗血清2-氨-4-氯硫酚 96%

Rabbit Meiiones Unguiculataus Milme-Edwauds Whole serum  兔抗長爪沙鼠IgG抗血清4-氨-4'-硝二硫 98%

Donkey human IgG Whole serum  驢抗人IgG抗血清2,2'-二氨二二硫 98%

Donkey rabbit IgG Whole serum  驢抗兔IgG抗血清4,4'-二氨二二硫 98%

Donkey Goat IgG Whole serum  驢抗羊IgG抗血清2-氨硫酚 98%

Donkey Guinea IgG Whole serum  驢抗豚鼠IgG抗血清4-氨硫酚 96%

AGEs (advanced glycosylation end products)  晚期糖化終末產物蛋白3-氨硫酚 97%

AGEs control article(advanced glycosylation end products control article)  晚期糖化終末產物蛋白對照品2-酰噻吩 99%
反應五要素：

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。