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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
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牙齦卟啉單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)50次

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-11-20 16:04:08瀏覽次數(shù):138次

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規(guī)格 50次 貨號(hào) YS-P013558
品牌 YSRIBIO
牙齦卟啉單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:牙齦卟啉單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):YS-P013558

產(chǎn)品規(guī)格:50次

產(chǎn)品分類:PCR檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存:-20℃保存

產(chǎn)品有效期:一年

產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。QQ截圖20201028113934.png

實(shí)驗(yàn)過(guò)程:

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2.公司產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1(10pM)               2μl

引物2(10PM)              2μl

Taq酶(2U/μl)            1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

ddH2O至               50 μl

PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

PCR檢測(cè)試劑盒 (2).jpg 

 

 

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):

1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。

2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。

4.   實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。

5.   優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。

S100鈣結(jié)合蛋白A12(S100A12 )O-叔丁-L-絲氨酸酯鹽酸鹽γ-微管蛋白GCP6抗體

豬狀腺結(jié)合球蛋白(TBG) L-纈氨酸酯鹽酸鹽β-葡萄糖苷酶1抗體

豬周期素依賴性激酶5(CDK5) L-纈氨酰鹽酸鹽甘氨酸裂解系統(tǒng)H蛋白抗體

豬血管活性腸肽(VIP)1,4-丁二雙鹽酸鹽15號(hào)染色體開放閱讀框58抗體

豬雄激素誘導(dǎo)蛋白1(AIG1) 半胱鹽酸鹽淀粉結(jié)合域蛋白1抗體

Rac-GTP酶激活蛋白1(Rac-GAP1)甘氨酰鹽酸鹽延伸因子G1抗體

豬前梯度蛋白2(AGR2)  L-羥脯氨酸酯鹽酸鹽β葡萄糖苷酶2抗體

豬紅膜蛋白(EMP) D-亮氨酸酯鹽酸鹽β葡萄糖苷酶3抗體

豬可溶性CD14分子(sCD14)L-甘氨酸酯鹽酸鹽膠質(zhì)母瘤相關(guān)蛋白GBAS抗體

豬神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP) D-氨酸酯鹽酸鹽紅糖苷α1抗體

豬胎盤蛋白(PP) 利格列汀;利拉利汀G蛋白結(jié)合蛋白1抗體

豬粘蛋白2(MUC2)L-谷氨酸-α-芐酯G蛋白結(jié)合蛋白4抗體

豬自身免疫調(diào)節(jié)因子(AIRE)L-亮氨酸酯鹽酸鹽G蛋白結(jié)合蛋白6體

豬紅藻氨酸離子型谷氨酸受體2(GRIK2) L-氨酸芐酯對(duì)磺酸鹽鳥苷酸環(huán)化酶激活蛋白1抗體

豬膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG) L-氨酰鹽酸鹽鳥苷酸環(huán)化酶激活蛋白2抗體

豬滑行蛋白β(TXLNb)L-組氨酸鹽酸鹽鳥苷酸環(huán)化酶激活蛋白3抗體
牙齦卟啉單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒Persephin  PSP抗體磷 分析標(biāo)準(zhǔn)品

SRC  src原癌因抗體倍標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/ml

SRC3/KAT13B/AIB1  類固受體輔助活化因子-3標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=4%

Phospho-SRC-3 (Thr24)  磷酸化類固受體輔助活化因子-3磷標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=6%

phospho-Src(Tyr529)  磷酸化Src原癌因抗體三光氣 99%

phospho-Src (Tyr418)  磷酸化Src原癌因抗體正戊 98%

SRF/SAP2/MCM1  生長(zhǎng)激素釋放因子抗體(血清應(yīng)答因子)二異辛 99%

Phospho-SRF (Ser103)  磷酸化生長(zhǎng)激素釋放因子抗體(血清應(yīng)答因子)環(huán)戊 99%
使用方法:

一、樣品采集:

1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。

2、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。

3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。

4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。

一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。

2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。

4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用

6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

 


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