實驗操作步驟： 
a．采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

公司向您推薦大鼠脈絡膜血管細胞的詳細說明：

產品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩(wěn)定。在技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度?？萍继峁┑募毎袠藴实蔫b定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、科技售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。
細胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長特性，在適當?shù)臅r候進行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細胞，一般按1：2-1：5 稀釋細胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
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實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

豬肺疫疫苗培養(yǎng)基氧化亞錫 AR，99%尿嘧啶核苷pUNO1-hRAF1

馬肉湯氧化亞錫 99.9% metals basis 尿酸二鈉pUNO1-hRANTES

馬肉湯錫酸鈉 CP,53.67% SnO22,6,8-三羥基嘌呤pUNO1-hRARRES3

馬瓊脂錫酸鈉 AR,55.3% SnO2氨基酸脂pUNO1-hRB1

仔豬副傷寒疫苗培養(yǎng)基二氧化錫 AR,99.5%脲酶pUNO1-hRBBP4a

培養(yǎng)基二氧化錫  ≥99.95% metals basis過氧化尿素pUNO1-hRBBP7b

改良 Minca 培養(yǎng)基基礎納米二氧化錫  99.9% metals basis，50-70nm脲pUNO1-hRBM3

雞毒支原體疫苗培養(yǎng)基 納米二氧化錫 99.99% metals basis，50-70nm阿糖尿苷pUNO1-hNFkBp65

無菌輔酶Ⅰ（NAD）溶液二氧化錫 SP2,4-二羥基嘧啶pUNO1-hRELB

無菌青溶液化亞錫 AR，98%10-十一烯酸pUNO1-hRFC4

大鼠脈絡膜血管細胞1,3-雙(二苯膦基)烷 97%Narirutin；蕓香柚皮苷3,5-二酸Rat GnRH(Gonadotropin-Releasing Hormone) ELISA Kit

Rat GP-ⅡbⅢa(Plaet Membrane Glycoprotein ⅡbⅢa) ELISA Kit

(±)-2,2'-雙-(二苯膦基)-1,1'-聯(lián)萘 98%Sodium phytate；植酸鈉2-吡咯烷酮Rat GPC3(Glypican 3) ELISA Kit

Rat GR(Glucocorticoid Receptor) ELISA Kit

雙(氰苯)二鉑(II) Pt ≥41.0%Lauric acid；正十二烷酸/月桂酸貓飼料小魚干Rat GRAP2(GRB2-Related Adapter protein 2) ELISA Kit

Rat GRB10(Growth Factor Receptor Bound Protein 10) ELISA Kit

雙(二亞芐基酮)鈀 Pd 18.5%Vinblastine Sulfate；硫酸長春堿山楂酵母粉（多維）Rat GRB14(Growth Factor Receptor Bound Protein 14) ELISA Kit

Rat GREM1(GremLin 1) ELISA Kit

2,2'-雙(二)聯(lián)苯 98%Oxalic acid/Ethanedioic acid；無水草酸鈉維生素E粉（強力新型）Rat GRN(Granulin) ELISA Kit

Rat GROα/CXCL1(Growth Regulated Oncogene Alpha) ELISA Kit

1,2-雙（二基膦）烷 97%misartan；替米沙坦牛羊豬胃寶Rat GROβ(Growth Regulated Oncogene Beta) ELISA Kit

Rat GROγ(Growth Regulated Oncogene Gamma) ELISA Kit

1,1'-雙(二異基膦)二茂鐵 98%Hispidulin；高車前素矽藻素Rat Glul(Glutamine synthetase) ELISA Kit

Rat GS(Gelsolin) ELISA Kit

4,6-二(二膦)吩嗪 98%Sulfapyridine；磺胺吡啶電解多維 2108Rat GSTA1(Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit

Rat GSTP(Glutathione S-transferase P) ELISA Kit

雙（1,5環(huán)辛二烯）的鎳（0） 96%Pregnenolone；孕甾烯醇酮獸用青苔粒粒殺Rat GSTT1(Glutathione S Transferase Theta 1) ELISA Kit

Rat GZMK(Granzyme K) ELISA Kit

二雙(三環(huán)己基膦)鎳(II) 97%Isochlorogenic acid B；異綠原酸B熒光增白劑CBS-XRat HABP1(Hyaluronan Binding Protein 1) ELISA Kit

Rat HbA1C(Glycosylated Hemoglobin/Hemoglobin A1c) ELISA Kit

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。