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規(guī)格 | 50T | 貨號 | YS-P014328 |
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品牌 | YSRIBIO |
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:犬巴貝斯蟲(Bab)檢測試劑盒(熒光-PCR法)
產(chǎn)品貨號:YS-P014328
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品分類:PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.公司產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
麻楓樹酚酮B(標準品)英文名稱: rU Phosphoramidite肌肉特異性環(huán)指蛋白3抗體包裝5g
(草)(標準品)英文名稱: Bz-rA Phosphoramidite磷酸化原癌基因c-Met相關(guān)酪氨酸激酶抗體包裝1g
(中)(標準品)英文名稱: i-bu-rG Phosphoramidite絲裂原活化蛋白激酶13抗體包裝25g
根(標準品)英文名稱: Dacomitinib多纖毛素蛋白抗體包裝5g
麻醉椒苦素英文名稱: Ac-rC Phosphoramidite肌管素相關(guān)蛋白8抗體包裝100g
麻醉椒素英文名稱: Tetrodotoxin巨噬甘露糖受體2抗體包裝25g
馬鞭草(標準品)英文名稱: Tetrodotoxin周期G1的相互作用蛋白抗體包裝5g
馬勃(標準品)英文名稱: Ac-dC Phosphoramidite主導(dǎo)控制樣蛋白3抗體包裝1g
馬齒莧(標準品)英文名稱: 2,2'-Anhydro-5-Me-U絲裂原活化蛋白激酶MKK3抗體包裝5g
馬兜鈴(北馬兜鈴)(標準品)英文名稱: 7-Deaza-7-I-2’-dGMYSM1抗體包裝1g
馬兜鈴酸A(標準品)英文名稱: 7-Deaza-7-I-2’-dA單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體包裝5g
馬兜鈴酸C英文名稱: Dideoxyadenosine微管相關(guān)蛋白1A抗體包裝10g
馬兜鈴酸D英文名稱: Xylitol中期因子/肝素結(jié)合生長因子抗體包裝50g
馬兜鈴酸II英文名稱: Xylitol鹽皮質(zhì)受體抗體包裝25g
馬蘭草(標準品)英文名稱: 2',3'-Dideoxythymidine促黑α抗體包裝5g
犬巴貝斯蟲(Bab)檢測試劑盒(熒光-PCR法)PCA-1/Yo(Human purkinje cell autoantibody) ELISA Kit 人抗浦肯野抗體/抗Yo抗體乳糖蛋白胨培養(yǎng)液 BR
Human Sa-antibody ELISA Kit 人抗Sa抗體LEB增菌液 BR
ANNA-2/Ri(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit 人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體李氏增菌液礎(chǔ) BR
hnRNP/RA33(Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/RA33-antibody) ELISA Kit 人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體水解乳蛋白 BR
Q-Ab(Human Q fever antibody) ELISA Kit 人抗Q熱抗體麥芽浸膏 BR
PM-Scl/PM-1(Human polymyositis-sclerosis antibody) ELISA Kit 人抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體麥芽汁瓊脂培養(yǎng) BR
Human PL7-antibody ELISA Kit 人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成酶霉菌液體培養(yǎng) BR
PL12/AlaRS(Human PL12-antibody) ELISA Kit 人PL12抗體/抗氨酰tRNA合成酶麥芽浸膏湯 BR
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
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