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行業(yè)產(chǎn)品
當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>PCR類>>熒光定量PCR試劑盒>> 50次牛腺病毒(4-8型)通用PCR試劑盒
規(guī)格 | 50次 | 貨號(hào) | YS-P013436 |
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品牌 | YSRIBIO |
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:牛腺病毒(4-8型)通用PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):YS-P013436
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐
的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.公司產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
大鼠趨化因子CXC配體16(CXCL16)鄰三聯(lián)(標(biāo)準(zhǔn)品)DENND2A蛋白抗體
大鼠趨化素樣因子(CKLF)間三聯(lián)(標(biāo)準(zhǔn)品)DENND1B蛋白抗體
大鼠趨化素樣因子超家族4(cklfsf4)2,4,6-三硝標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.00mg/ml,體:)DEPTOR蛋白抗體
大鼠趨化素樣因子超家族5(cklfsf5)四氯酚(標(biāo)準(zhǔn)品)耳聾常染色體顯性遺傳相關(guān)蛋白1抗體
大鼠趨化素樣因子超家族6(cklfsf6)對(duì)三聯(lián)(標(biāo)準(zhǔn)品)短鏈脫氫酶/還原酶家族9抗體
大鼠趨化素樣因子超家族7(cklfsf7)1,3,5-(標(biāo)準(zhǔn)品)短鏈脫氫還原酶13抗體
大鼠趨化素樣因子超家族10(cklfsf10)十一烷(標(biāo)準(zhǔn)品)視網(wǎng)膜短鏈脫氫酶/還原酶家族7抗體
大鼠膽囊收縮素受體(CCKAR)十一酸(標(biāo)準(zhǔn)品)短鏈脫氫酶/還原酶家族X抗體
大鼠膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)對(duì)二(標(biāo)準(zhǔn)品)短鏈脫氫酶/還原酶家族4抗體
大鼠血管緊張素原(AGT)對(duì)二標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.00mg/mL,體:)干擾腎癌蛋白2抗體
大鼠膽固(CH)間二標(biāo)準(zhǔn)溶液(1mg/ml in M,for Water Analysis)DGCR2蛋白抗體
大鼠蕈堿型膽堿受體M2(CHRM2)鄰二(標(biāo)準(zhǔn)品)短鏈脫氫酶/還原酶家族7C抗體
大鼠絨毛膜促性腺激素(CG)己二酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))松果體N酰羥色抗體
大鼠染色質(zhì)解旋酶因結(jié)合蛋白3(CHD3)酰(Standard for GC,≥99.5%(GC))短鏈脫氫還原酶1抗體
大鼠染色質(zhì)解旋酶因結(jié)合蛋白5(CHD5)蒽(standard for GC,≥99.5%(GC))DNAJC7蛋白抗體
大鼠嗜鉻粒蛋白A(CHGA)茴香(Standard for GC,≥99%(GC))動(dòng)力結(jié)合蛋白DNMBP抗體
牛腺病毒(4-8型)通用PCR試劑盒LEF-1 淋巴增強(qiáng)因子-1抗體1-溴-4-氯丁烷 98%
Leptin 瘦素抗體1-溴-5-氯戊烷 97%
Leptin 瘦素抗體1-溴-6-氯己烷 98%
Leptin receptor 瘦素受體抗體環(huán)戊烯 96%
Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體(長(zhǎng))環(huán)戊烯 GCS,≥99.5% (GC)
Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體(長(zhǎng))環(huán)戊烯 98%
Leptin receptor(L/M/S) 瘦素受體抗體(長(zhǎng)、中、短型)溴戊烷 99%
L-enk 亮氨酸腦啡肽抗體氯, 含穩(wěn)定劑銅, 97%
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