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行業(yè)產(chǎn)品
當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA檢測試劑盒>>大鼠ELISA檢測試劑盒>> 大鼠乙酰膽堿(Ach)ELISA檢測試劑盒
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠乙酰膽堿(Ach)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rat acetylcholine (Ach) ELISA Kit |
貨號(hào) | YS-R12597 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
黃芪多糖 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥70%;20mg
羊藿次苷I 56725-99-6 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
熊去氧膽酸 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
L-脯氨酸 147-85-3 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥99%;200mg
11-羥基柳杉酚 88664-08-8 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg
二啡酰菊苣酸 70831-56-0 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
澳洲茄邊堿 20311-51-7 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
桑皮苷C 102841-43-0 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
灰氈毛忍冬皂苷乙 136849-88-2 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
香葉木素-7-O-葡萄糖苷 20126-59-4 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
左旋堿 541-15-1 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
斷血流皂苷A 916347-31-4 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
地奧司明 520-27-4 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥95%;20mg
異土木香內(nèi)酯 470-17-7 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
人參皂苷Rg1 22427-39-0 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
大鼠乙酰膽堿(Ach)ELISA檢測試劑盒MR-VP發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠腎足突細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基 規(guī)格: 1000ml/瓶 用途: 用于分離和初步鑒別單增李斯特氏菌和其它李斯特菌
萬古霉素(改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨湯凍干配套試劑) 規(guī)格: 10支/盒 用途: 每支添加于100ml(022212)中配成MLST
轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)天然蛋白 英文名稱:Native Transferrin Receptor (TFR)
腸型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Fatty Acid Binding Protein 2, Intestinal (FABP2)
基質(zhì)重塑關(guān)聯(lián)蛋白5(MXRA5)重組蛋白英文名稱:Recombinant Matrix Remodelling Associated Protein 5 (MXRA5)
腎素(REN)重組蛋白英文名稱:Recombinant Renin (REN)
粘蛋白20(MUC20)重組蛋白英文名稱:Recombinant Mucin 20 (MUC20)
JEG-3(人絨毛膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
WTRL1(大鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人惡性黑色素瘤細(xì)胞英文名稱:A375
人食管細(xì)胞英文名稱:KYSE30
小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:M1
無菌綿羊血清/Sterile Defidrinated Sheep BloodBR100毫升國產(chǎn)/進(jìn)口
操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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