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規(guī)格 | 50次 | 貨號 | YS-P013379 |
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品牌 | YSRIBIO |
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:放線菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號:YS-P013379
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐
的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.公司產(chǎn)品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
小鼠 Friend白血病病綜合因子1(FLI1)天狼猩紅癌胚抗原相關(guān)粘附分子21抗體
小鼠αL巖藻糖苷酶(FUCA) DL-2氨基丁酸(>98.5%,BR)貓眼綜合征染色體候選基因5抗體
小鼠G蛋白β1(GNb1)DL-2-哌啶羧酸(>98%,BR)CUE結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
小鼠半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S) DL-苯甘氨酸(>98%,BC)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白52抗體
小鼠β-半乳糖苷酶(GLb)DL-beta-苯氨酸(>98%,BR)補體片段C3c抗體
小鼠甘肽受體1(GALR1)DL-肉堿鹽酸鹽卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白68抗體(皮膚T淋巴淋巴瘤相關(guān)抗原)
小鼠半乳凝集素 1(GAL1)DL-鳥氨酸鹽酸鹽(>98%,BC)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83抗體
小鼠半乳凝集素 2(GAL2)DL-(>99%,BP)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白21抗體
小鼠半乳凝集素 3(GAL3)甲基烯酸二甲氨乙酯(>99%,BR)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體(狀甲狀腺癌編碼蛋白)
小鼠半乳凝集素 4(GAL4)D-蘋果酸(>98%,BR)周期素依賴激酶2相關(guān)蛋白2抗體
小鼠半乳凝集素 6(GAL6)DMS1號染色體開放閱讀框201抗體
小鼠半乳凝集素 7(GAL7)D-正亮氨酸(>99%,BC)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體
小鼠半乳凝集素 8(GAL8)鹽酸多巴卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白80抗體
小鼠半乳凝集素 9(GAL9)DSTCD163蛋白樣1抗體
小鼠半乳凝集素 12(GAL12)2'-脫氧尿苷-5'-三磷酸三鈉鹽周期素依賴性激酶5調(diào)節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體
小鼠γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶1(gGT1)四氫甲基嘧啶羧酸(>98%,BR)22號染色體開放閱讀框31抗體
放線菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型流感病血凝素抗體磷鉬酸鈉,水合 AR
Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型流感病血凝素抗體次氯酸鈉溶液 AR,6-14% active chlorine basis
Haase 透明質(zhì)酸酶/玻璃酸酶抗體次氯酸鈉 CP,available chlorine 5.5 %
HADHSC (human) 短鏈L-3羥烷基輔酶A脫氫酶抗體(人)次氯酸鈉溶液 ACS,available chlorine 5.00 %
HADHSC (rat, mouse) 短鏈L-3羥烷基輔酶A脫氫酶抗體(大鼠,小鼠)硫代乙酸鈉 AR,80.0%
HSA 人血清白蛋白單克隆抗體硫代乙酸鈉 BR
KCNH1/EAG1 離子通道蛋白EAG1抗體硫代乙酸鈉 98%
HERG/KCNH2/ERG 特異性離子通道蛋白抗體亞硝基鐵化鈉 AR,99.0%
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