當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>PCR類>>熒光定量PCR試劑盒>> 50T鱖魚彈狀病毒(SCRV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格 | 50T | 貨號 | YS-P014388 |
---|---|---|---|
品牌 | YSRIBIO |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
服務流程:
公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
鱖魚彈狀病毒(SCRV)檢測試劑盒(熒光-PCR法) | 50T | YS-P014388 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
端羧基外消旋聚乳酸(重均分子量6-9.5萬)英文名稱: TG100-115氧化固結合蛋白4抗體包裝1g
端羧基外消旋聚乳酸(重均分子量73-109萬)英文名稱: Difenidol Hydrochloride抗凋亡蛋白OLFM44抗體包裝25g
端羧基外消旋聚乳酸(重均分子量9.5-16萬)英文名稱: Urapidil Hydrochloride結腸癌過度表達蛋白1抗體包裝5g
端羧基右旋聚乳酸(重均分子量0.3-1.5萬)英文名稱: Urapidil Hydrochloride卵巢癌反應抗原抗體包裝1mg
端羧基右旋聚乳酸(重均分子量1.5-3萬)英文名稱: Flunarizine Hydrochloride卵巢癌相關基因1抗體包裝1g
端羧基右旋聚乳酸(重均分子量102-137萬)英文名稱: Flunarizine Hydrochloride氧化應激誘導生長抑制因子1抗體包裝250mg
端羧基右旋聚乳酸(重均分子量137-170萬)英文名稱: Fexofenadine Hydrochloride氧化固結合蛋白8抗體包裝1g
端羧基右旋聚乳酸(重均分子量17-26萬)英文名稱: Fexofenadine Hydrochloride泛素特異性蛋白酶OTB1抗體包裝250mg
端羧基右旋聚乳酸(重均分子量170-206萬)英文名稱: Nizatidine視神經(jīng)相關蛋白1抗體包裝100g
端羧基右旋聚乳酸(重均分子量206-288萬)英文名稱: Aceglutamide鳥氨酸脫羧酶抗酶1抗體包裝25g
端羧基右旋聚乳酸(重均分子量26-36萬)英文名稱: Montmorillonit嗅覺受體家族5亞基1抗體包裝500g
端羧基右旋聚乳酸(重均分子量3-5.5萬)英文名稱: Bergamottin胚胎干關鍵蛋白抗體包裝5g
端羧基右旋聚乳酸(重均分子量36-48萬)英文名稱: Ropivacaine hydrochloride 土霉素抗體包裝25g
端羧基右旋聚乳酸(重均分子量48-73萬)英文名稱: Guaijaverin腫瘤/抗原117包裝5g
端羧基右旋聚乳酸(重均分子量5.5-9萬)英文名稱: Emtricitabine鳥氨酸脫羧酶抗酶2抗體包裝5MG
鱖魚彈狀病毒(SCRV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)TPHuman thymidinephosphorylase) ELISA Kit 人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶水質(zhì)鈦標樣 分析標準品
PARP(Human Poly ADP ribose polymerase) ELISA Kit 人多聚ADP核糖聚合酶鈦 99.8%,60nm,松裝密度0.54g/cm3,黑色
GCK(Human glucokinase) ELISA Kit 人葡萄糖激酶5-煙酸 97%
MAO(Human monoamine oxidase) ELISA Kit 人單氧化酶化 GR,≥99.5%(AT)
cPLA2(Human cytosolic phospholipase A2) ELISA Kit 人胞漿型磷脂酶A2化鈉 CP,99.0%
DAO(Human diamine oxidase) ELISA Kit 人二氧化酶三 AR,99.0%
COX-2(Human cyclooxygenase-2) ELISA Kit 人環(huán)加氧酶2三 CP,98.5%
CDK5(Human Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶5三 standard for GC,>99.8%(GC)
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務必確認供應商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。