購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

 親環(huán)蛋白 人肽酰脯氨酰異構酶 規(guī)格： 48T/96T

 PG 人肽聚糖 規(guī)格： 48T/96T

 PPI 人肽基脯氨酰順反異構酶 規(guī)格： 48T/96T

 pMHC 人肽-MHC復合物 規(guī)格： 48T/96T

 PLGF 人胎盤生長因子 規(guī)格： 48T/96T

 PL 人胎盤泌乳素 規(guī)格： 48T/96T

 PLAP 人胎盤堿性磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T

 HPRI 人胎盤核糖核酸抑止劑 規(guī)格： 48T/96T

 PP 人胎盤蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 HPL 人胎盤催乳素 規(guī)格： 48T/96T

 HBF 人胎兒血紅蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 FK506 人* 規(guī)格： 48T/96T

 TREM-1 人髓系細胞觸發(fā)受體-1 規(guī)格： 48T/96T

 MBP 人髓鞘堿性蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T

ER2566 感受態(tài)細胞 100ul*10 MBP 人髓磷脂堿性蛋白 規(guī)格： 48T/96T

人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG 人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG 規(guī)格： 48T/96T

 MPO 人髓過氧化物酶 規(guī)格： 48T/96T

 ASM 人酸性神經(jīng)鞘磷脂酶 規(guī)格： 48T/96T

 ACP 人酸性磷酸酶 規(guī)格： 48T

shēng huà shì jì 磷脂酰乙醇胺 容量： 500克

shēng huà shì jì 磷脂酰* 容量： 25毫克

shēng huà shì jì 磷酰二肽 容量： 25克

shēng huà shì jì 磷鎢酸鈉 容量： 保存：-20℃ 100毫克

shēng huà shì jì 磷鎢酸 容量： 25片

shēng huà shì jì 磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基 容量： 150米

shēng huà shì jì 磷酸鋅 容量： RT 25克

shēng huà shì jì * 容量： 100克

shēng huà shì jì 磷酸烯醇丙酮酸單環(huán)己銨鹽 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 磷酸三正丁酯 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 磷酸三乙酯 容量： 2～8℃，避光 25克

shēng huà shì jì 磷酸三鈉 容量： 100克

shēng huà shì jì 磷酸三鉀 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 磷酸*酯 容量： RT，避光 25克

shēng huà shì jì 磷酸三鈣 容量： 500克

shēng huà shì jì 磷酸三苯酯 容量： 2～8℃ 20毫克

shēng huà shì jì 磷酸氫鎂 容量： RT 100毫升

shēng huà shì jì * 容量： 25克

shēng huà shì jì * 容量： 2～8℃ 1克

shēng huà shì jì 磷酸氫二銨 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 磷酸葡萄糖異構酶 容量： RT 1克

shēng huà shì jì 磷酸葡萄糖變位酶 容量： 5克

/96T

注意事項:

1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?；蜻B接產(chǎn)物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。