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OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 100ul*50-生
OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 100ul*10-生
OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*50-生命科學儀器
OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*10-生命科學儀器
Origami2(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*50-生命科學儀器
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產品名稱 | Origami2(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*50 |
包裝 | 100ul*50 |
分類 | 表達感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蜻B接產物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
TSA 人腫瘤特異性抗原 規(guī)格: 48T/96T
TSGF 人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子 規(guī)格: 48T/96T
TRANCE 人腫瘤壞死因子相關激活誘導因子 規(guī)格: 48T/96T
TRAIL-R4 人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4 規(guī)格: 48T/96T
TRAIL-R3 人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3 規(guī)格: 48T/96T
TRAIL-R1 人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1 規(guī)格: 48T/96T
TNFsR-Ⅱ 人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ 規(guī)格: 48T/96T
TNFsR-Ⅰ 人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ 規(guī)格: 48T/96T
TNF-β 人腫瘤壞死因子β 規(guī)格: 48T/96T
TACE 人腫瘤壞死因子α轉化酶 規(guī)格: 48T/96T
TACE 人腫瘤壞死因子α轉化酶 規(guī)格: 48T/96T
TNF-α 人腫瘤壞死因子α 規(guī)格: 48T/96T
Origami2(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*50 CA724 人腫瘤標志物 規(guī)格: 48T/96T
NAP-2/CXCL7 人中性粒細胞趨化蛋白2 規(guī)格: 48T/96T
NGAL 人中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白 規(guī)格: 48T/96T
NAP 人中性粒細胞堿性磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
NE 人中性粒細胞彈性蛋白酶 規(guī)格: 48T/96T
MK 人中期因子 規(guī)格: 48T/96T
LXA4 人脂氧素A4 規(guī)格: 48T/96T
LTA 人脂磷壁酸 規(guī)格: 48T/96T
ADP 人脂聯素 規(guī)格: 4
shēng huà shì jì 葡聚糖T200 容量: 保存:-20℃ 500u
shēng huà shì jì 葡聚糖T20 容量: 保存:-20℃ 200u
shēng huà shì jì 葡聚糖T110 容量: 保存:-20℃ 500u
shēng huà shì jì 葡聚糖T11 容量: 10KU
shēng huà shì jì 葡聚糖T1000 容量: 2000u
shēng huà shì jì 葡聚糖T100 容量: 2500u
shēng huà shì jì 葡聚糖T10 容量: 保存:-20℃ 1000U
shēng huà shì jì 葡聚糖 容量: 2~8℃ 500U
shēng huà shì jì 破傷風梭菌培養(yǎng)基基礎 容量: 100克
shēng huà shì jì 蘋果酸脫氫酶測試盒(測組織) 容量: 100支/包
shēng huà shì jì 蘋果酸脫氫酶測試盒(測血清) 容量: 500支/包
shēng huà shì jì 蘋果酸脫氫酶 容量: 2~8℃,避光 1克
shēng huà shì jì 蘋果酸鈉三水物 容量: 2~8℃ 5克
shēng huà shì jì 蘋果酸鈉 容量: 500克
shēng huà shì jì 平板計數瓊脂 容量: 100克
8T/96T
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?;蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2.待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
5.根據實驗需求,取適量已轉化的感受態(tài)細胞,加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時。
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