當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>技術文章>>如何檢測原代細胞中的細菌污染呢?
細菌:細菌在原代細胞普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現象!可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理。
霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質,37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現絮狀雜質,鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內,再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。 CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉移,采用過氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把過氧乙酸放置在孵箱內一個小時,使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。 其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。
預防霉菌污染,原代細胞可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或放線菌素D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或放線菌素D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞。,將環(huán)境*消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
含量測定 100mg 100880-200601 雙氯芬酸鉀
檢查用 50mg 100881-200601 5-{4-[2-(5-乙基-2-吡啶基)乙氧基]苯基亞甲基}-2,4-噻唑二酮
檢查用 50mg 100881-200601 鹽酸吡格列酮雜質A
HPLC法含量測定 100mg 100883-200601 酒石酸羅格列酮
含量測定 100mg 100885-200601 草酸艾司西酞普蘭
含量測定 100mg 100886-200601 依西美坦
檢查 20mg 100887-200601 依西美坦中間體
含量測定 100mg 100889-200901 鹽酸曲美他嗪
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